枇杷iPBS分子标记的PCR体系优化与引物筛选

作者:顾林平; 张冰; 费艳; 王化坤; 王鹏凯 江苏省苏州市吴中区金庭镇农林服务站; 江苏苏州215119; 江苏省太湖常绿果树技术推广中心; 江苏苏州215107; 江苏省农业种质资源保护与利用平台; 南京210014; 苏州农业职业技术学院; 江苏苏州215008

摘要:以枇杷的DNA为模板进行iPBS-PCR扩增,采用预备试验中效果较好的iPBS分子标记引物2241,对枇杷iPBS-PCR反应体系中的dNTP、Mg^2+、引物、模板用量进行优化。根据检测结果确定枇杷iPBS-PCR使用10×Taq buffer 2μL,25mM Mg^2+1.6μL,2.5mM dNTP 1.6μL,10μmol/L Primer 1μL,5U/μL Taq酶0.2μL,模板DNA 5ng的20μL反应体系。反应程序中的退火温度可以参考iPBS引物理论Tm值。对33条iPBS引物扩增测试的结果显示在该反应体系下可以筛选到谱带清晰、多态性好的引物22条,可用于枇杷的分子标记分析。

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国际刊号:1007-1431

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