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首页 > 期刊 > 微生物学免疫学进展 > 利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌 asaA 基因 【正文】

利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌 asaA 基因

作者:李磊; 王一诺; 邹清华 北京大学基础医学院病原生物学系; 北京100191; 全国医学教育发展中心; 北京10019

摘要:目的利用Red重组系统敲除鲍曼不动杆菌ATCC17978的asaA。方法设计上下游引物中包含asaA的同源序列,并以pKD4质粒为模板,扩增含有卡那霉素抗性基因的DN段。将该片段转化于表达重组酶的17978感受态细胞中,在卡那霉素筛选压力下,得到经两次同源双交换的具有卡那霉素基因标记的突变菌株。随后,在重组酶的作用下将抗性基因去除,最终得到无抗性基因标记的突变菌株ΔasaA。结果通过该重组系统,首先将卡那霉素抗性基因的DN段替换了基因组中asaA的DN段,然后将卡那霉素抗性基因的DN段消除,最终获得了asaA缺失的突变体。结论通过Red重组系统为鲍曼不动杆菌中其他基因的缺失突变提供方法与思路。

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微生物学免疫学进展杂志

微生物学免疫学进展杂志, 双月刊,本刊重视学术导向,坚持科学性、学术性、先进性、创新性,刊载内容涉及的栏目:论著、文摘、致读者·作者、综述等。于1973年经新闻总署批准的正规刊物。

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