高原鼠兔瘦素蛋白乳腺特异表达载体的构建及细胞表达

作者:庞礴; 于鸿浩; 张湑泽; 谢玲; 付林; 赵新全; 郭松长 中国科学院西北高原生物研究所; 高原生物适应与进化重点实验室; 西宁810001; 中国科学院大学; 北京100049; 桂林医学院生物技术学院; 桂林541004; 青海民族大学生态环境与资源学院; 西宁810007; 温州医科大学药学院分子药理学研究中心; 温州325035; 湖南农业大学动物科学技术学院; 长沙410128

摘要:瘦素(Leptin)蛋白是调节机体能量代谢的关键因子之一。前期研究显示高原鼠兔Leptin蛋白发生了适应性进化。功能实验表明,在温暖或寒冷条件下高原鼠兔Leptin通过减少食物摄取和增加能量消耗调节能量平衡,显示了其调节适应性产热过程的潜力。本研究以高原鼠兔Leptin cDNA为模板扩增高原鼠兔obese(ob)基因编码区序列504bp,改造并构建哺乳动物真核细胞乳腺特异表达载体pBC1-lep,同时通过组织块法原代培养建立奶山羊乳腺上皮细胞系,并通过pBC1-lep质粒脂质体法转染及转基因细胞的筛选,成功获得转染Leptin的阳性细胞。本研究为利用转基因动物实现奶山羊乳腺中特异表达高原鼠兔Leptin提供了一条可能的途径,完成了乳腺特异真核表达载体的构建。

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