摘要:目的:研究干细胞定向分化为内皮细胞的效率,并与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)比较。方法:用两步法诱导干细胞HUES9分化为内皮细胞,前3 d在N2B27培养基中加入骨形态发生蛋白4(25 ng/m L)和肝糖原合成激酶3β受体的选择性抑制剂CHIR99021(10μmol/L)使细胞分化到中胚层状态,第4天开始用VEGF165(200 ng/m L)和Forskolin(2μmol/L)将细胞诱导为内皮细胞。观察分化第6天细胞形态,并与HUVECs比较。用CD144作为内皮细胞表面标志物,流式细胞术检测分化效率及分化后细胞的身份。比较两种内皮细胞迁移和成管能力。结果:分化后的内皮细胞与HUVECs在显微镜下形态一致。分化细胞表面标志物阳性率达到73.4%,重新培养后的内皮细胞表面CD144阳性率达到86.6%,HUVECs为94.4%。分化后的内皮细胞与HUVECs均具有良好的迁移和成管能力,但分化后的内皮细胞能力不如HUVECs强。运用SB431542后,能够提高分化后内皮细胞的迁移和成管能力。结论:此两步法将干细胞分化为内皮细胞有较高的分化效率,可作为理想的分化方法。
注:因版权方要求,不能公开全文,如需全文,请咨询杂志社