体外定向诱导胚胎干细胞分化为内皮细胞及其与脐静脉内皮细胞的比较

作者:汪雁归; 毛萧萧; 杨天伦 中南大学湘雅医院心内科; 长沙410008; 湖南省人民医院老年病科; 长沙410005

摘要:目的:研究干细胞定向分化为内皮细胞的效率,并与人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)比较。方法:用两步法诱导干细胞HUES9分化为内皮细胞,前3 d在N2B27培养基中加入骨形态发生蛋白4(25 ng/m L)和肝糖原合成激酶3β受体的选择性抑制剂CHIR99021(10μmol/L)使细胞分化到中胚层状态,第4天开始用VEGF165(200 ng/m L)和Forskolin(2μmol/L)将细胞诱导为内皮细胞。观察分化第6天细胞形态,并与HUVECs比较。用CD144作为内皮细胞表面标志物,流式细胞术检测分化效率及分化后细胞的身份。比较两种内皮细胞迁移和成管能力。结果:分化后的内皮细胞与HUVECs在显微镜下形态一致。分化细胞表面标志物阳性率达到73.4%,重新培养后的内皮细胞表面CD144阳性率达到86.6%,HUVECs为94.4%。分化后的内皮细胞与HUVECs均具有良好的迁移和成管能力,但分化后的内皮细胞能力不如HUVECs强。运用SB431542后,能够提高分化后内皮细胞的迁移和成管能力。结论:此两步法将干细胞分化为内皮细胞有较高的分化效率,可作为理想的分化方法。

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湖南医科大学学报

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国际刊号:1008-8229

国内刊号:43-1308/C

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