时间:2023-01-08 13:29:40
序论:在您撰写救火事迹材料时,参考他人的优秀作品可以开阔视野,小编为您整理的7篇范文,希望这些建议能够激发您的创作热情,引导您走向新的创作高度。
Abstract: China's fire accidents caused by building thermal insulation material frequently appeared. Civil building exterior insulation system is one of the causes of frequent fire accidents in energy efficiency. How to draw a lesson from the costly and great fire and further improve the fire prevention work of building exterior insulation materials are imminent.
关键词: 保温材料;现存问题;解决措施
Key words: thermal insulation material;existing problems;countermeasures
中图分类号:TU5 文献标识码:A 文章编号:1006-4311(2014)06-0132-02
0 引言
近年来,随着我国经济建设的蓬勃发展,建筑行业也得到了长足的进步,但是在飞速发展的同时,随之而来的各类建筑工程事故也是层出不穷,安全问题越来越成为我们建筑行业在工程建设中不可忽略的因素。一直以来,火灾的发生给人类的生命和财产带来了很大的损失,企业建筑物施工及使用过程中的防火在建筑防灾中越来越受到人们的重视。保温材料一般是指导热系数小于或等于0.2的材料。近些年,我国发生的大大小小的火灾事件,如2008年的“济南奥体中心体育馆两次火灾”,到北京央视新址火灾、南京中环国际广场火灾、上海“11.15”特别重大火灾事故、“沈阳第一高楼”大火等一系列重大火灾事故,都是由于外保温材料使用不当引起的,也是为我国建筑行业在使用建筑外保温材料上敲响警钟。
1 事故分析
1.1 事故经过 2011年10月27日下午4点半左右,郑州市一在建高层居民楼发生火灾,发生火灾的居民楼工地属于郑弘房地产开发有限公司,外墙保温材料外侧美化铝塑板起火燃烧。火灾发生后,消防部门接报后,迅速派出20多辆消防车130余名消防官兵赶赴现场扑救,经过一个多小时的扑救,于6点左右扑灭大火。
经勘查,起火工地属于郑弘房地产开发有限公司,具体着火部位为在建天元世家工地3号楼25至32楼东立面,系外墙保温材料外侧美化铝塑板起火燃烧。过火面积约200平方米。火灾未造成人员伤亡。
据统计,去年建筑工地类火灾占全市各类火灾数量的30%以上,其中建筑可燃易燃保温材料已成为一类新的火灾隐患。在施工过程中,一些开发商和保温材料生产企业“配合”,拿着合格的阻燃保温材料进行检测,施工时却用易燃的低价产品,这一块块易燃保温板贴在在建住宅外墙上,埋下了安全隐患。
1.2 事故分析
1.2.1 直接原因 经过我们调查分析,在大楼进行装修施工的时候,主要是由于2名电焊工违规操作,使得短时间内形成火灾的。通过这起火灾,我们不难看出以下5个方面的问题:①电焊工没有专业的资格证,严重违反操作规程,引发火灾后逃离现场;②装修工程违规建筑,层层分包,导致安全责任不落实;③在施工现场管理混乱,存在明显的安全落实不完善的现象;④事故现场还使用大量的违规易燃的材料,如尼龙网和聚氨酯泡沫等易燃材料,导致火势很快蔓延起来;⑤有关部门监管不力,导致安全管理不到位,才会发生此次火灾。
由此我们不难看出,引发事故的原因主要有三类,施工组织不合理,建筑材料使用不规范,工程监管不负责。
1.2.2 间接原因 工程中的缺陷,就是由人为的或自然的原因,在建筑物的正常使用过程中出现的种种不足。按照不同程度的现象,我们可以分为以下三类:①轻微缺陷。由于它们并不影响建筑物结构的承载力等完整性,但是却妨碍地面的不平整、地面混凝土龟裂、钢板上划痕等现象。②使用缺陷。虽然不会影响建筑结构的承载力,但是会给人不安全的感觉。而大多是由于施工不合理和建筑材料使用不合理或者偷工减料造成的。③危及承载力缺陷。虽然采用材料的强调不足或者结构件截面尺寸不够,但是这类威胁到结构的承载力和稳定性不及时消除,就可能导致局部或整体被破坏。
三类缺陷可能是显露的,如屋面渗透;也可能是隐蔽的,如配筋不足等等在隐蔽部位建筑材料使用的不合理。两者相比,后者更危险,因为它有良好的外表的假象,一旦有所发展,后果可能很严重。
通过上述分析,在造成建筑安全事故的各种因素中,从建筑材料的角度,我们重点关注的是由于建筑材料的问题直接引起的或者与建筑材料相关的各类工程事故。
2 防治措施
2.1 要严把消防设计审核关 国家现行消防技术规范 《高层民用建筑设计防火规范》《建筑设计防火规范》等文件中,对建筑材料燃烧性进行分类,对不同等级的易燃烧的建筑材料进行规定,在使用过程中,就需要严格遵守规定,从源头上避免建筑外墙保温材料火灾隐患产生。
2.2 建立多部门联合监管机制 建立“源头把关,抽样送检,部门协同,全程监管”的机制是有效遏制外保温系统火灾事故的关键。“源头把关,抽样送检”,就是对外保温材料的选用通过消防设计审核、审查和抽样送检实施监管,严把材料的燃烧性能关口;“部门协同,全程监管”,就是协调建设主管部门及其相关业务单位,与消防机构一道对外保温系统从设计、用材到施工过程进行全方位监管。建筑工程一直都是消防监督检查工作的重点对象。在专项整治的基础上,采取切实有效措施,进一步加强消防安全监督管理工作。对未排查的建筑要全面排查,对排查出的隐患要限期消除。通过加强地方立法、制定地方标准、研发推广新型建筑外墙保温材料等措施,探索建立加强建筑外墙保温材料监督的长效机制。
2.3 落实在建工地施工现场防火责任制 组织工程技术和施工人员需要深入熟悉设计图纸,这样才能保证在施工过程中的消防安全。就需要编制保温材料专项施工方案,以此来制定保证工程质量技术措施和安全操作规程的技术文件。而编制专项的消防安全方案,才能保证施工的消防安全。以此来制定实战演练为基础的应急预案,达到增强应急意识的目的。以此来落实消防安全的生产责任制,保证各项生产制定的安全进行。针对施工现场用火等现象然后多火灾进行合理的预防,以此来督促施工单位对消防安全“四个能力”建设,还要定期加强员工消防安全教育不定期的岗前培训,使施工人员能够达到“一懂三会”要求,提高自防自救能力。
2.4 组织开展消防安全专题培训 为了避免灾害的发生,就需要定期对工程项目等负责人开展定期的专题讲座等各种宣传,以此提高相关人员的消防安全意识。通过开展安全知识等培训,一定程度上能提高管理人员与施工人员的消防安全知识掌握水平,还要积极策划开展建筑外保温材料消防安全巡回培训班、施工人员消防技能比赛等趣味性、实用性、互动性强的宣传活动,使管理人员与施工人员的消防安全知识掌握水平得到大幅度提升,杜绝火灾事故的发生。
3 结束语
火灾也是灾害的一种,但是和大自然的灾害相比较,突出特点就是具有鲜明的经济特性。我们从消防的安全角度看,降低火灾损失的决定性防范效果就是经济手段。因此,我国市场利益多元化、市场主体多样化、市场关系等也变得相对复杂,因此就需要完善监管制度。如果标准制度的安排存在不合理的现象,就会使得消防成本低于依法所得,因此有的企业和个人不惜压力消防成本,铤而走险,有的甚至违章。我们要从一起起的火灾里吸取教训,除了要完善防火救火的技术层面外,也要提高自身的更深入的思考。
参考文献:
[1]张树培.防水材料选用[M].中国建筑防水出版社,1998.
【关键词】防火安全; 防火材料; 材料发展趋势
中图分类号:TU998文献标识码: A
一、引言
在组成建筑的重要材料之一就是建筑防火材料,其在建筑物中起到十分重要的作用。很多年前的建筑物,由于建筑施工人员防火意识比较淡薄,从而对建筑防火材料的使用不够重视; 甚至某些施工单位为了获取利益,减少甚至不使用建筑防火材料。这些由于建筑防火材料劣质、防火装备不到位造成了人员伤亡和经济的巨大损失。由此可见,建筑防火材料是建筑物消防建设的一个重要拼图。本文第一部分对简单介绍了一般建筑防火材料进,第二部分则对建筑防火材料的发展趋势进行了预测和分析。
二、建筑防火材料的应用
2.1 轻质新型复合材料
2.1.1 石膏型复合材料
石膏产品质量较轻,具备一定保温、吸声的性能,且阻燃性能较好。石膏材料大部分是复合材料,其基体一般是无机质材料石膏。一般的二水石膏是水合物,在发生火灾时,二水石膏的结晶水受热后脱除,在脱结晶水的过程中二水石膏吸收很大的燃烧热,从而降低燃烧物的表面温度,且在脱除的结晶水时燃烧物表面容易形成水蒸气气幕,起到隔绝氧气的作用,从而也能起到阻燃作用。形成的无水石膏也是绝热体和阻燃物。正是由于石膏的优良阻燃特性,其制备的石膏复合材料被广泛应用于建筑中。
2.1.2 纤维加强型水泥板材
以水泥为基材,添加适当的胶粘剂,在向其中加入石棉或者玻纤,即可制备得到纤维增强型水泥板材。它具备板材厚度较小、板材质量较轻、板材的力学性能优良(抗拉强度和抗冲击强度高)、耐候性较好和阻燃性能优良等特点,这种材料被广泛应用于各类墙体及复合墙体方面。
2.1.3 以钢丝网为芯的复合板材
在钢丝网上覆盖轻质板或者轻质混凝土为即可制备钢丝网型复合板,这种复合板材结合了很多种材料的多种优良特性,其在减薄墙体的厚度和减轻墙体的重量方面起到十分显著的作用。
2.1.4 金属基板材及其复合材料
金属基板材及其复合材料是常见的金属型防火材料。这种材料耐火性能优良,属于难燃型材料。
2.2无机轻质防火材料
2.2.1 岩棉和矿渣棉
岩石在高温处理后即可制成的人造纤维,这种纤维就是岩棉,这种纤维阻燃性能较好及低导热系数等性能,因此其可被做为一些防火装备和防火绝热板材。利用冶金炉中的矿渣制备的纤维为矿渣棉,这种材料具有阻燃性能好、较低的导热系数等特点。上述两种纤维在建筑保温材料方面得到广泛应用。
2.2.2玻璃棉
玻璃棉也是一种人造纤维材料,其以白云石和蜡石等为原料制成的不燃性材料。玻璃棉具有很多优点,其在建筑防火和保温材料应用广泛。
2.2.3 硅酸铝型纤维
硅酸铝型纤维是质轻、耐火性优良的人造纤维,是一种新型耐火材料。其制品可在建筑和装饰材料方面得到广泛应用。
2.2.4 膨胀型珍珠岩
膨胀型珍珠岩具有轻质、多功能和耐火性优良等优点,其主要以珍珠岩矿石为原材料制备而成,其在建筑保温、防火和吸声方面应用广泛。
2.3 阻燃和自熄灭型泡沫塑料
阻燃和自熄灭型泡沫塑料:自熄灭型PS(聚苯乙烯)发泡材料、阻燃型PS(聚苯乙烯)发泡材料、阻燃型PU(聚氨酯)发泡材料、PVC(聚氯乙烯)发泡材料、脲醛发泡材料等。这些材料在建筑物防火、保温及装饰等方面得到广泛应用。
2.4 板材和砌块材料
2.4.1 加气混凝土型轻质材料
加气混凝土型轻质材料分为砌块和条板两种制品。加气混凝土是以含钙型材料、含硅型材料制成混凝土型材料,然后加入发气剂制备而成的材料。其在承重墙体和保温材料等方面被广泛应用。
2.4.2 轻质混凝土型材料
利用水泥为主要原材料,对主体材料进行改性或者配方调节即可制成轻质混凝土砌块和板材,这种产品具有种类和用途多样性等优点,这种材料主要在保温、防火、隔声等方面被广泛应用。
2.4.3 由粉煤灰制备的墙体材料
粉煤灰墙体材料主要是指粉煤灰型砌块和粉煤灰空心小型砌块。通过调节粉煤灰、石膏、石灰等原料的比例或者对原料进行改性即可制成不同类型的粉煤灰型砌块,其主要应用于工业建筑及民用墙体。通过调节粉煤灰、水泥等原料的比例或者对原料进行改进即可制成的粉煤灰空心小型砌块,其在建筑中也得到广泛的应用。
2.4.4 其他类型的阻燃材料
其他类型的建筑阻燃材料包括改性防火型吊顶板、无卤阻燃型胶合板、耐火级木地板等。隔绝材料表面的氧气和降低材料表面燃烧温度是一般防火材料的阻燃机理。当材料中的阻燃剂在火灾中遇热后熔化后,带走材料表面大量热量,从而有效的降低防火材料表面温度;且阻燃剂在材料表面易于形成致密的碳层,这样起到隔绝氧气作用;与此同时,材料能产生较多的不可燃性气体也起到隔绝材料表面空气的作用。为了有效降低建筑物的火灾危险性,阻燃型材料被广泛应用于装修建筑内部 [1]。
三、新型防火材料的研发方向
3.1 防火板材技术发展趋势
新型防火板材的发展方向主要参考环保要求,因此主要有:利用无机物做基体制备复合板材或者采用轻质材料来制备复合板材。在降低建筑器件的成本方面,厚度较薄、质量较轻的防火板越来越受到青睐。
3.2 新型阻燃材料的开发
为了有效确定高分子材料的安全使用,很多研发人员开发了新型的阻燃技术。严格的环保规定和阻燃标准对阻燃型高分子材料提出了新的挑战, 因此阻燃和环保相结合已经成为新型高分子阻燃材料的发展方向[2]。
3.3 防火涂料技术发展趋势
防火涂料通常是通过加入阻燃剂来实现阻燃作用, 因此防火涂料的发展方向主要有: 调节配方使涂料中多种阻燃剂发挥协同作用;制备具有阻燃效果的催化剂和发泡剂,这样可以猝灭氧自由基或者形成致密碳层隔绝氧气;制备无卤阻燃剂,然后添加到无机防火涂料中,这样制备的涂料可以达到环保要求。
3.4 防火封堵材料技术的开发
向材料中加入卤素阻燃剂来增强材料的阻燃性能是大部分阻燃材料进行阻燃实现的途径,防火封堵材料大部分也是采用这种方式来达到阻燃效果。目前,很多国家出于对环境保护的要求,对燃烧时产生毒性和酸性气体的防火封堵材料进行了禁止使用的规定,所以制备新型无卤阻燃助剂已成为全球新型阻燃材料开发的必然发展态势[3]。
3.5 绿色防火材料的开发
随着人们对环保要求越来越高,以可循环使用的材料或可再生资源制备绿色防火材料在建筑材料领域发挥着越来越重要的作用,尽量把制备低毒、低烟和无污染性等特性的材料做为创新点。例如近期开发洁净阻燃型材料, 这种材料具有燃烧时没有太多烟气放出且燃烧时没有浓烈刺鼻的气体放出,因此为火宅现场的人员疏散逃生创造了有利条件和争取了时间, 而且在降低起火灾方面起到十分重要的作用[4]。
四、结束语
无论是传统的防火材料或者新型防火材料的开发方面,国内企业与国际先进水平相比差距较大,这即是国内企业需要解决的难题,同时开发成功的新型防火材料也可以给企业带来十分显著的经济效益。因此国内生产防火材料的企业应注重品种、质量、性能的创新,以市场为导向,设计高品质的阻燃产品,从而提高我国防火材料的创新能力和生产水平。同时,由于人们对环保提出越来越高的要求,因此努力开发环保化和绿色化新型防火材料。
参考文献
[关键词]凝胶;泡沫灭火;煤炭自燃;体积半衰期
中图分类号:TM711.5 文献标识码:A 文章编号:1009-914X(2017)12-0392-01
1 引言
凝胶N2泡沫新材料应用中,施工前由施工负责人组织有关人员到施工地点掌握现场情况,参加施工人员应熟知《煤矿安全规程》有关规定。施工前,对该巷道杂物及险段提前进行清理和加固,确保施工安全与施工进度。计划所需物料、设备全部采用矿车运输,装运材料要有专人负责,各种料车均不能超过矿车高度,运送时严格遵守有关规定。井下卸运笨重物料、设备时,要相互照应,精力集中,准备携带的小型材料和工具要拿稳,确保安全。所需物料、设备到达施工地点后,靠巷帮堆放,要整齐,注胶泵要稳定好,不得影响运输、通风、行人。采用全风压通风,特殊情况采用导风或安设风机,保证通风安全。在施工地点安设电话一部,发现异常情况,采取措施进行处理。施工人员要配备必要的劳保用品。
2 注凝胶设备应用技术管理
凝胶N2泡沫新材料应用中,施工专职电工及设备维修工负责施工中电气设备的安全管理及设备维修。设备接电、撤电,由电工负责,电工必须持证上岗,严禁带电作业。非专职人员不得擅自操作电气设备,严格执行“谁停电谁送电”制度。所有电器设备必须防爆,电缆吊挂整齐,开关上架,并挂牌管理,及时检修,符合有关规定。工作地点的所有电器设备放在施工地点以里5米处,注胶泵的皮带传动部分必须安装防护罩,确保安全。注胶设备:NJB-1-80型凝胶泵是一种用来输送凝胶的泵组,它可自动地将水、基料、促凝剂按一定比例混合后,经三个出液口输送到用胶地点。根据各种材料的配比不同,凝胶混合液可在十几秒至几十分钟内形成固态胶体,用于煤矿直接灭火和堵漏。
3 凝胶N2泡沫灭火新材料应用安全研究
3.1 起动操作
首先检查机器各紧固螺丝,不得有松动现象。检查各泵和流量调节器油箱内的油,必要时加入各自的油。泵用油是30~40号机油,变速器用专用的UD油。盘车检查各泵能否转动自如。检查电器开关、起动器。检查各输送胶管、接头和过滤网。将主泵吸水管和溢流管放入配好促凝剂的水箱中;将胶管的吸管和溢流管放入胶料箱(或胶料桶)中。打开混合器出口的3个阀门。待起动正常后再按需要关掉1~2个。任何情况下必须保证有1个阀门全开且畅通。
3.2 注胶过程中的操作
待基料料箱内的基料注完后,可在不停机的情况下快速地把吸料管和溢流管换进另一只基料料箱中,这样可保持连续注胶。促凝剂箱只需不断地往料箱中补充材料,不需要来回移动吸料胶管。胶料流量无级调节器只能在泵运转的情况下调节,严禁停机时调节。泵的调压器是用来限定注胶压力并防止电机过载的,供货时已经调好,不要随意调节。注胶时若发现溢流管有溢流,首先要检查输送管和混合器是否堵塞,混合器出口阀门是否打开。一般情况下是不会有溢流的。
3.3 停泵操作
注胶结束后,必须将主泵和胶泵都输送清水3分钟以上,并同时将混合器的3个出料阀门都打开,以保证泵内、管内和混合器内没有混合液和胶料存在。将各泵的吸管从清水箱中拿出,将吸口放在无粉尘和杂物的地方(最好用手拿着),让泵继续运转吸水5分钟,这样可将泵内的积水排出。
4 凝胶N2泡沫灭火施工研究
4.1 施工准备
准备两个0.5m3的铁箱,用于储存基料;并准备1个0.6m3(φ0.9m,高度1m)的铁箱,用于配制促凝剂溶液。将3个铁箱放置于灭火巷道内的注胶设备附近;配好设备入口管路,并配好设备出口的变头,使之能与混合器通过25mm的高压软管相连;配好混合器出口变头,使之能与25mm的注胶高压软管连接,并准备25mm的注胶高压软管10根(10m长的6根,5m长的4根);1寸阀门6个(注胶时接在钻孔上,钻孔泄漏时可随时关闭阀门);准备l寸管(接钻孔口的l寸阀门)变25mm的高压接头(接25mm的注胶高压软管)的变头6个,连接设备出口和注胶钻孔
根据其它矿的灭火经验,基料在井下的运输相当困难,为了便于井下基料运输,可将基料用汽油桶运至巷道开口处,用泥浆泵将基料通过管道输送到注胶设备的基料储存箱;每班按注胶6小时计算,每班注胶量为30m3。井下胶体材料需保证2天的用量,基料量为18t,促凝剂量为7t。地面需保证5天的用量,基料量为45t,促凝剂量为18t;基料的泥浆泵两台,流量为3m3/h。并铺设输送基料的管路。注胶顺序,先注终孔位置较低的钻孔,再注终孔位置较高的钻孔,防止因注高位孔时,堵塞低位孔。
4.2 施工步骤
将基料用泥浆泵输送到基料储存箱,每班需用泥浆泵输送基料两次(共3t),第一次输送4桶(约1m3,重1.3t),根据注胶设备流量,可使用约3小时,第二次输送5桶。注胶前先接清水管冲冼每个钻孔3~5分钟。将注胶管路连接好(每次连接3个),注胶泵入口管路放入相应的料箱,启动注胶泵压注凝胶。待基料料箱内的基料注完后,可在不停机的情况下快速地把吸料管和溢流管换进另一只基料料箱中,这样可保持连续注胶。促凝剂箱只需不断地往料箱中补充材料(每3分钟向料箱内添加1袋),不需要来回移动吸料胶管。随时检查各钻孔的进胶情况,如发现有不进胶的钻孔,应及时将其拆下,接上清水管冲冼。如有钻孔从钻孔周围向巷道返胶,应先将基料吸液管从料箱中拿出,待注胶管冲冼过后,再关闭该钻孔的阀门,然后再将基料吸液管放入料箱继续注胶。待将该钻孔处理好后,再打开阀门继续注胶(或接至其它钻孔注胶)。停止注胶后,再用泵继续注清水5分钟,冲冼注胶管路,防止凝胶堵塞高压软管。将每班注胶量及注胶情况及时填入现场记录本,以便下一班查询,并向防火办公室汇报。
关键词:血管内皮生长因子VEGF;BMP-2;骨再生
据估计,全世界每年有2.2 万的骨科、神经外科及口腔科患者因骨缺损行骨移植手术。目前常见的骨移植材料有自体骨、同种异体骨、脱矿化骨基质、异种骨、合成材料、组织工程产品等。自从灭活骨、脱钙骨能够诱导异位骨再生的现象被发现以来,科学家们认识到蛋白在诱导骨再生中起到关键作用,基于生物活性分子的骨组织工程成为研究的热点。骨是高度血管化的组织,血管生成对骨再生至关重要。缺乏血管生成会导致骨再生中骨形成和骨总量减少。新生的血管对于营养供应、分子信号的传输和干细胞的运输十分重要。血管生成对骨再生的意义重大,众多学者尝试利用促进血管生成的因子与骨再生的因子结合共同促进骨愈合。本研究试图利用VEGF与BMP-2制备基因活化的仿生生物材料,观察其对骨缺损的愈合中的促进作用。
1 资料与方法
1.1实验分组 实验分为5个组,包括:纯壳聚糖/胶原支架,记为G1(group 1);整合BMP-2腺病毒的壳聚糖/胶原支架,记为G2(group 2);整合VEGF腺病毒的壳聚糖/胶原支架,记为G3(group 3);整合BMP-2腺病毒和VEGF腺病毒的壳聚糖/胶原支架,记为G4(group 4);以及整合BMP-2腺病毒和VEGF蛋白的壳聚糖/胶原支架,记为G5(group 5)。
1.2壳聚糖胶原支架的制备及复合病毒 将壳聚糖用0.5mol/L乙酸配成2%(w/v)的溶液,将胶原按2%比例溶解于壳聚糖溶液中,磁力搅拌48h后注入培养皿,4℃ 下放置30min,-35℃放置过夜,最后-80℃放置2h成型后移入冷冻干燥机冻干,48h后干燥完成。支架在接种细胞或病毒前需灭菌,具体步骤如下:先以0.3M NaOH的溶液中和材料中的乙酸,然后75%乙醇浸泡12h,大量PBS冲洗去除残余乙醇,紫外线照射30min。
将壳聚糖/胶原支架切块。在无菌操作台内,将病毒液滴于支架上,使之浸润,具体量为:对于G2,G3组,1ml 的腺病毒溶液滴到1mg 的干燥的壳聚糖/胶原支架上,4℃ 过夜使支架与质粒或腺病毒充分结合,然后-80℃放置2h成型后移入冷冻干燥机干燥。对于G4组, Ad-BMP-2与Ad-VEGF病毒液等体积混合后,吸取1ml滴到1mg壳聚糖/胶原支架上,4℃ 过夜使支架与质粒或腺病毒充分结合,然后-80℃放置2h成型后移入冷冻干燥机干燥。对于G5组,将2mg VEGF-D蛋白溶解于2ml的灭菌的去离子水中,获得的终浓度为浓度为1mg/ml,将2ml溶液滴于干燥的壳聚糖/胶原支架上,再将1ml 的Ad-BMP-2病毒溶液滴到1mg 的干燥的壳聚糖/胶原支架上,所获得的支架为每1mg 支架有2mg VEGF蛋白及1mlAd-BMP-2病毒液;4℃ 过夜使支架与质粒或腺病毒充分结合,然后-80℃放置2h成型后移入冷冻干燥机干燥(图1示冷冻干燥机及干燥过程)。
1.3整合不同生长因子的支架对骨髓间充质细胞增殖分化影响的相关研究 MTT 法检测支架材料对骨髓间充质细胞增殖的影响。将五种支架各选4 块置于24孔板内,第四代骨髓间充质细胞消化后,以1×105 细胞的密度接种于支架,每个支架100μl细胞悬液。3h后添加 150μl 10%FBS 的DMEM培养液继续培养,分别在1、3、7d 检测细胞增殖活性。
ALP检测:接种方法同前,3 h后添加 900μl 10%FBS 的DMEM 培养液继续培养,分别在7d和14d 检测ALP活性。具体方法如下:7和14d后,取上清液,80μl的上清加20μl的0.5M的AMP,然后加入100μl底物,混匀后37°孵育1h。取50μl上清,按碱性磷酸酶试剂盒说明书在405nm波长下测ALP活性。根据换算出的每孔细胞的ALP值和DNA的总量的比值来计算每孔细胞的ALP活性,单位是nmoles paranitrophenol/ng DNA/min。
1.4骨缺损修复的观察 选取 6 只2岁大的中华田园犬,手术在全麻下进行。局部消毒后,拔除下颌前磨牙,清理牙槽窝后,去除牙槽间隔,以得到骨缺损模型。植入种植体,将支架放入近中牙槽窝,缝合。将G1-G5组每组中的一个样本随机置于种植体近中缺损区,以保证每只狗都含有5个组的样本。术后肌肉注射抗生素(40万单位/ml,0.1ml/kg体重),动物软食2w。12w时取材,截取下颌骨种植体周围缺损区骨,低速涡轮机及去离子水冲洗冷却下分割标本,进行组织学观察。
2 结果
2.1 材料制备。
2.2通过MTT法检测支架材料对骨髓间充质细胞增殖的影响。第四代骨髓间充质细胞三维培养于支架材料中后,分别在1、3、7d检测,每组每个时间点检测四个样品。结果显示(图2),复合病毒或/和生长因子蛋白的壳聚糖/胶原支架与壳聚糖/胶原材料对骨髓间充质细胞的增殖没有影响,病毒或/和生长因子蛋白对骨髓间充质细胞的增殖无毒性作用。
2.3 ALP活性是细胞成骨向分化的标记。骨髓间充质细胞在各组复合支架上三维培养时的ALP活性如图3所示,7d和14d培养后,培养于复合Ad-BMP-2的支架上的骨髓间充质细胞均表现出较高的ALP活性(P
2.4组织学染色 组织学切片观察种植体周围的组织形态,图4可见,种植体周围均形生成了成熟的骨组织,骨组织中均有新生成的血管。定性观察发现,G3与G4组新生成的血管较其他组高,G2,G4及G5组的骨生成多于G1,G3组,以G5组最高。
3 讨论
骨缺损修复是复杂的生理过程,一般涉及到细胞迁移、增殖与分化以及骨重建[1]。通常骨形成可通过两种不同的方式:假如骨断端是固定的,或者在发育阶段颅面部骨形成过程中,在将要形成骨的部位间充质前体细胞直接分化为骨细胞成骨,成为膜内成骨;若发生在有动度骨折断端间,或者发育过程中的长骨和腰椎,则先形成软骨称之为软骨化骨。新生血管提供营养和氧气的供应,同时为血液循环中的间充质细胞提供途径到达缺损区,以及增加骨细胞的增殖分化而起作用,在骨折愈合的初期十分重要 [2]。VEGF是主要的血管生成因子[3]。它在出生后的血管生成起到重要的作用。VEGF对肥厚性软骨结构和血管化都十分重要。众多研究发现,VEGF 单独不能促进成骨[4,5],已有研究证实VEGF与BMPs联合使用能促进细胞存活率[6],诱导成骨细胞增殖与分化[7],以及促进骨细胞迁移[8],通过这种方式促进了骨的再生。众多学者在动物模型中联合应用VEGF 与BMP-2促进骨再生,总的来说,大多数因子的联合使用较单独使用能增加成骨,单独使用VEGF 不足以促进成骨,联合使用VEGF能促进骨再生中的血管再生,这与本研究结果一致。有研究指出,在骨折愈合中,血管发生发生在成骨之前[9]。因此,开发一种模拟内源性基因释放的这种呈时间特异性表达的基因控释系统对骨组织工程意义十分重大。
由于VEGF在骨再生中有多种作用, VEGF除了促进成骨细胞的存活,它还能诱导血管再生。VEGF刺激内皮的增殖与迁移,并参与祖细胞的招募及分化为内皮细胞[10,11]。高剂量的VEGF已被证实能导致血管通透性的增加,并在骨再生中诱导产生大量的非生理性的内皮细胞管腔[12]。
研究者已经成功复合了壳聚糖/胶原支架。对于复合支架来说,壳聚糖的加入能降低细胞介导的收缩率,即在培养细胞的过程中,复合材料的收缩度比单纯胶原支架的收缩率小,材料的机械性能有所增强。细胞在复合支架中更容易黏附,生长并增殖。分析是因为胶原成分的加入在四个方面提高了材料的细胞相容性:其一,降低了复合材料的孔径,增大了材料的细胞容积;其二,增大了复合材料的吸水性,使细胞在支架中更容易交换营养与代谢物;其三,胶原本身可作为细胞营养的来源;其四,降低了材料的降解性能,使细胞更容易渗透到支架内部生长继而引发进一步的支架降解。总的来说,本实验制备了一种基因控释支架,通过冷冻干燥法使生长因子与腺病毒结合,腺病毒介导的外源性基因能高效表达,在缺损区局部释放,避免了腺病毒导致的免疫反应,在骨再生中具有潜在的应用前景。
参考文献:
[1]Carano RA, Filvaroff EH. Angiogenesis and bone repair. Drug Discov Today 2003;8:980-9. [2]Asahara T, Takahashi T, Masuda H, et al. VEGF contributes to postnatal neovascularization by mobilizing bone marrow-derived endothelial progenitor cells[J]. EMBO J,1999,18:3964-3972.
[3]Peng H, Wright V, Usas A, et al. Synergistic enhancement of bone formation and healing by stem cell-expressed VEGF and bone morphogenetic protein-4[J]. J Clin Invest,2002,110:751-759.
[4]Peng H, Usas A, Olshanski A, et al. VEGF improves, whereas sFlt1 inhibits, BMP2-induced bone formation and bone healing through modulation of angiogenesis[J]. J Bone Miner Res, 2005,20(11):2017-2027.
[5]Samee M, Kasugai S, Kondo H,et al. Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) and vascular endothelial growth factor (VEGF) transfection to human periosteal cells enhances osteoblast differentiation and bone formation[J]. J Pharmacol Sci,2008,108:18-31.
[6]Byrne AM, Bouchier-Hayes DJ, Harmey JH. Angiogenic and cell survival functions of vascular endothelial growth factor (VEGF)[J]. J Cell Mol Med,2005,9:777-94.
[7]Wang, D.S., Miura, M., Demura, H. & Sato, K. Anabolic effects of 1,25-dihydroxyvitamin d3 on osteoblasts are enhanced by vascular endothelial growth factor produced by osteoblasts and by growth factors produced by endothelial cells[J]. Endocrinology,1997,138: 2953-2962.
[8]Mayr-Wohlfart U, Waltenberger J, Hausser H, et al. Vascular endothelial growth factor stimulates chemotactic migration of primary human osteoblasts[J]. Bone,2002,30:472-477.
[9]Sojo K, Sawaki Y, Hattori H, et al. Immunohistochemical study of vascular endothelial growth factor (VEGF) and bone morphogenetic protein-2, -4 (BMP-2, -4) on lengthened rat femurs[J]. J Craniomaxillofac Surg,2005,33:238-245.
[10]Winet, H. The role of microvasculature in normal and perturbed bone healing as revealed by intravital microscopy[J]. Bone,1996,19: 39S-57S.
以小班幼儿生活区游戏活动――舀的工作为例,探索材料的层次性投放的实践研究。教师在区域中提供给幼儿练习舀的材料,其中发生的故事值得我们解读、反思和调整。
玩具简介:
“舀豆子”是一个投放在小班生活区的低结构玩具。
材料投放:两个大容器、大小不同的勺子、弹珠。
玩具的玩法:让孩子学会使用勺子,从装有弹珠的容器中将弹珠一个个舀到另一个空容器中,鼓励幼儿尽量把弹珠全部转移干净,并且保证弹珠不滚落出容器和勺子外。
一、基于观察的第一次材料投放
(一)观察案例
案例一:畅畅彩棒圈珠子
最近两次活动中,畅畅都游荡在各个区域间,看看这个,瞧瞧那个,就是不愿意进去玩,尽管老师引导了,她还是一个劲摇头,最终在好朋友的邀请下,选择生活区“舀珠子”的工作。她拿起勺子在小碗里将珠子从这个碗舀到旁边的空的小碗里,没过多一会儿,她就开始东张西望,已经对舀珠子的游戏没有了兴趣。看见旁边的琪琪正在进行小彩棒搭建的活动,畅畅忽然兴奋起来,她拿起小勺子,舀起碗里的弹珠,放到琪琪用小彩棒搭的格子里,咕噜咕噜弹珠滚到了地上。怎样才能让珠子固定不滚动?在反复尝试了多次,最终,她们用小彩棒搭了完整四边形珠子被圈住了。当时,谁也没有想到好办法,但这也为接下来的游戏埋下了有趣的伏笔,为弹珠找家成为了“热门话题”。
案例二:欣欣送珠子回家
这天,我好奇看着欣欣在低着头,弓着腰,小心翼翼在不停摆弄着,并随着小珠子的滚动,还发出“哎呀哎呀”的叹息声,只见她拿起勺子看看,好像在琢磨着什么,又在放勺子的盘里,看看这个勺子,看看那个勺子,终于选好自己想用的勺,即:欣欣一个勺把短并且凹面深的勺子。再次拿起心仪的勺子,欣欣一次就将弹珠放进瓶盖了,她激动地从小椅子上跳了起来,喊道:“我送珠珠回到了家了”!原来欣欣一直在做珠子和瓶盖颜色对应的游戏。
(二)案例解读
关键词:东张西望、彩棒、短且凹面深
1.东张西望:舀珠子虽然是一个低结构的材料,但是,由于教师提供的材料品种的单一,如:仅提供弹珠作为舀的材料,孩子对机械、重复、单一的活动已经不感兴趣,东张西望。真正吸引孩子的是有趣、多变开放性操作的材料,要给孩子提供更多尝试、创作、想象的空间。
2.彩棒:畅畅选择小棒表明在孩子与玩具互动中,能够自己自发选择材料,对游戏有浓厚的兴趣,有创新游戏的能力,同时也迫切需要教师多种材料的支持其深入的探究。
3.欣欣能够根据自己的能力认知,对教师提供的多种材料,加以调适和选择。教师可以根据幼儿的能力投放材料,也可以适度增加超出或降低其能力的材料投放,这样符合《指南》中60%孩子能达到设定目标,而另外超出能力的20%或低于能力20%的孩子,我们应提供更多材料供孩子选择。
如何在原有的基础上持续吸引幼儿的学习兴趣,又能对幼儿的能力有一定的促进,这让我更关注孩子们游戏中的变化。
(三)材料支持策略:关注幼儿兴趣、支持他们自主游戏。
关键词:两个维度 舀的工具、舀的内容
第一维度:舀的工具 进一步丰富舀的工具,首先可以从勺的变化中给予支持,如勺把长短变化、勺面深浅变化、勺材质的变化。让孩子通过实践操作感受舀的工具多种变化,激发幼儿探索新的玩法吸引幼儿的兴趣。
第二维度:舀的内容 提供多种材料进一步炼幼儿手眼协调能力及手部的控制力,提供大小、形状各异的颗粒物,如珠子、豆子、铃铛。也可以提供粉末状如面粉、包谷糁舀出容易两个面,还可以提供多种材料:泡沫块、小铁块等。进一步练习幼儿的精细动作,增加游戏的难度。
二、基于观察的第二次材料投放
(一) 观察案例:
案例一:孙嘉逸在玩舀水工作
在舀水的工作,孙嘉逸拿了一个瓶子、拿起大勺子满满舀了一勺水,低着头身体慢慢移动着,小心翼翼地往漏斗里到,但总是把水洒在桌上、地上,试过几次后,水还是洒在桌上,他环视着周围,试图在寻找着什么,耷拉着脑袋撅着小嘴 ,他想放弃游戏。
案例二: 晨晨在玩舀水工作:
晨晨先拿了一个瓶子,大口深的勺子,舀起满满一勺水,也出现了的问题,水洒的到处都是,咦!怎么回事,只见他拿起小勺子,三指捏住,又看看自己一把抓拿着大勺子,噢明白了,晨晨脸上露出微微的笑容。大勺子也用三指捏办法,这样试试好多了,反复练习几次后他成功了。不过这次在舀的材料和形式都有了新的变化,水桶里多了一些大小形状不同的积木、雪花片、乒乓球,这些玩具漂浮在水面上,不仅增添游戏的难度,也使操作活动更有趣味性。晨晨选用小勺子,很自如把漂浮物都舀了出来,脸上露出了成功的喜悦。
(二)案例解读
关键词:三指捏、平移提升、少量多添、丰富材料
1三指捏:晨晨从开始一把抓的拿勺方式,到通过自我调整,自己借鉴已有的经验和技能,调适为三指捏勺的方式,最终获得游戏的成功。
2.平移提升:舀液体对孩子有了更高的要求。勺子舀水后先慢慢平移到瓶底处,再自然向上提升到瓶口处,最后倾斜勺子倒水。这一系列的动作对孩子手部协调性及控制能力有了较高的要求。
3.少量多添:案例中幼儿舀满满的一勺水,出现了水洒在桌上、地上,通过控制舀水的量进行自我调适,采用少量多添的办法操作,达成了通过主动操作提高幼儿动手能力和手眼协调能力的学习目的。
4.丰富材料:孙嘉逸放弃游戏,反映出可供幼儿选择的材料不足。先提供宽口瓶、大口深的勺子,降低了游戏的难度。待舀的技能有了一定基础后,再选择窄口瓶进行尝试。晨晨通过自我调适动作完成游戏,选择舀水里的漂浮物,用新的材料进一步练习手眼的协调能力及手部的控制力。在同一年龄段投放不同难度的材料,这样既满足幼儿的一般发展需要,又满足了个别幼儿特殊发展需要,让缺乏自信的幼儿看到成功,让已成功的幼儿不断看到新的方向。
(三 )材料支持策略:关注幼儿能力,适时调整材料投放
关键词:两个维度舀出容器、舀入容器
第一维度:舀出容器的变化 借鉴乌鸦喝水的故事,我思考从舀出容器本身的变化,增添游戏的难度 。如:原来盛物的容器小桶幼儿容易操作,为不断满足幼儿探索的欲望,改变舀出容器,提供窄口且深瓶子,幼儿在操作中不断尝试探索舀的方式。这样不仅增添游戏的难度,也使操作活动更有趣味性。
第二维度:舀入容器的变化 增加材料难度。如:将舀出的水倒在矿泉水的瓶盖上,增加游戏难度,进一步锻炼幼儿手眼协调能力和腕部的小肌肉的控制力。如:舀的是面粉,对幼儿有了更高的要求,倒入啤酒瓶时,不仅要控制好倒的速度,还要控制好勺子倾斜的角度。
三、基于^察的第三次材料投放
(一)观察案例
案例:运水游戏
我们将舀水的游戏活动,从室内转移到室外,从个人独立游戏演变成小组合作的运水游戏,游戏要求小组合作把大盆里的水运到对面的盆里,比一比哪组运的又快又好。
比赛开始,孩子们都用小碗、小杯、瓶子运水。石沐欣用小桶舀水后发现大盆里的水一下少了很多,她像发现新大陆似地说:“凯凯,快!你也去拿小碗舀水,晨晨我们一起抬起来。”欣欣他们拿来了小盆、用口杯、小碗往小桶里舀水……在大家齐心协力下,水很快就剩一点了,再怎么办呢?容容拿来了漏斗,把漏斗套在矿泉水瓶里,用勺子往瓶子里舀水。石沐欣着急地说:“这样太慢了,我们把大盆抬起来把水倒在瓶子里。几个孩子抬起大盆,“不好水洒在外面这样不行,还是用勺子舀吧”凯凯着急的大声喊道。……比赛结束了,石沐欣这组获得了第一名,孩子们高兴得跳起来。
(二)案例解读:
1.目标能够引导合作
小班幼儿以独立操作游戏为主,幼儿的交流合作较少。教师在设计“运水”游戏时,提供了各种能舀水材料,游戏的目标用不同的材料锻炼幼儿舀液体能力。以比一比哪组运的又快又好为游戏规则,激发幼儿合作的愿望,让幼儿尝试合作带来的乐趣。
2.材料能够促进合作
在玩“运水”的游戏中,提供了大小不一的舀水用具、一大盆水怎样又快又好的运完,简单的问题复杂化,增加了活动的难度,幼儿不能独立完成任务,迫使他们合作共同完成,在其中幼儿间多了一些分工、协商、配合的机会,使合作成了一种需要、一种必然,从而激发幼儿合作的欲望。
(三)材料支持策略:关注同伴间的材料,培养合作意识
关键词:两个维度 水量的变化、多元化的材料支持
第一维度:根据水量的变化 选用不同操作材料。游戏刚开始,大盆里的水量比较多,孩子们都用小碗、 瓶子运水。水量变少了怎么办?针对孩子在游戏中出现状况,给幼儿提供一些新的材料支持,较小的舀的工具,如瓶盖、小杯子、小勺子。支持幼儿互相合作快速、干净的将盆里的水舀干净,从而完成游戏目标。
【关键词】 组织型纤溶酶原激活因子(t-PA);包被Dacron;PTEE;表面血小板
近年来的很多研究表明[Lin TL,Lu FM,Sheu MS. Antimicrobial coatings: A remedy for medical device-related infections. Med Dev Tech,2001],在由生物材料引发的感染(biomaterial centered infection,BCI)中,45%的原因是因为生物材料与人体接触时,血液和组织中的纤维粘连蛋白(fibronectin)、玻璃粘连蛋白(vitronectin)和纤维蛋白原(fibrinogen)会吸附在材料表面,形成一层蛋白膜,而细菌很容易在这层蛋白膜上黏附,继而生长繁殖,逐渐形成一层顽固的水合多聚糖性质的生物活性膜(biofilm)[1]。这层生物膜可以吸收营养物质,具有一定厚度,产生很强的抗药能力,传统的抗菌治疗是无法根除的。根据细菌性感染的机理,本文就t-PA对生物材料表面血小板黏附的作用及影响进行初步探讨。
1 实验材料与方法
1.1 材料和仪器 涤纶(Dacron)B型(苏州华明织带有限公司),膨体聚四氟乙烯(PTEE,美国Gore&Associates公司)。谷胱苷肽硫基转移酶(Glutathione-S-trasferase,GST)和GST-t-PA融合蛋白由实验室制备,液体培养基(法国生物梅里埃公司)。
1.2 材料的包被 将Dacron和PTEE薄膜剪裁成96孔酶标板等大的原片,用蒸馏水充分漂洗干净后在70%的酒精中浸泡30min,无菌条件下取出、晾干,置入96孔板中,每种材料分成3组,每孔分别加入100μl含0.5mg/ml GST-t-PA的Tris-HCl缓冲液(pH8.0)或含0.5mg/ml GST的Tris-HCl缓冲液或单纯的Tris-HCl缓冲液,4℃放置过夜,弃去上清液,用Tris-HCl缓冲液(50mM Tris-HCl,pH8.0/120mM NaCl)轻轻漂洗两次移入新的96孔板孔中备用。
1.3 材料植入动物模型的制作 2.5~3.0kg雄性新西兰大耳白兔72只(武汉大学医学院动物实验中心),随机分为3组(各组24只):空白对照组,GST蛋白组和GST-t-PA蛋白组,每组又分为两组,D组(放置Dacron片)和PEET组(放置PEET片)。
动物称重后,2%戊巴比妥钠(35mg/kg)耳缘静脉麻醉动物,备皮消毒后沿股动脉走向切开皮肤,分离出两侧的股动脉和股静脉,结扎股动脉的侧枝循环,经股静脉注射肝素(10U/kg体重),5min后从两端夹闭股动脉,其间间隔不小于6cm,用眼科剪剪开0.3cm左右的纵口,用生理盐水将血管内的血液冲洗干净,然后放入经GST蛋白或GST-t-PA蛋白包被处理的两种涤纶材料膜片,空白组进行手术后血管缝合,不予以任何处理。用3-0聚丙烯线缝合血管,移去动脉夹使血流再通,密切观察手术处股动脉搏动情况。麻醉恢复后,正常饲养。于术后第2天,每组随机选8只行血小板沉积实验。
1.4 血小板在材料表面黏附的观察(体外实验) 取空白组新鲜兔动脉血,按9∶1的比例与3.8%的枸橼酸钠溶液混匀,离心分离富含血小板的血浆,用PBS将血小板数目调节至106/ml,取150μl加到上述处理的材料表面然后于37℃放置30min,弃取血浆,用PBS将材料膜片轻轻漂洗3遍后用2.5%的戊二醛固定2h,经冷冻干燥后进行扫描电镜观察。随机选取6个视野进行血小板计数。
1.5 对机体内血小板黏附的观察(在体实验) 在植入物后2天,各组8只动物按前述方法麻醉,常规分离提取血小板,于血小板悬液内逐渐滴加Cr51铬酸钠溶液18.5MBq(0.5mCi)。将51Cr标记的血小板悬液2ml经股静脉注入体内,1h后取出移植材料,用PBS轻轻冲洗,并置于γ记数井中记数,同时抽取全血标本确定以确定游离和细胞51Cr活性,测定血小板计数和凝血酶原时间(PT)。
2 结果
2.1 血小板在材料表面黏附的观察(体外实验) 结果显示,用t-PA重组蛋白及GST蛋白处理医用Dacron及PEEP片,可明显抑制血小板在其表面的粘附,对Dacron片,用GST包被使其表面的血小板数目比对照组减少了大约42.3%(P<0.01);而TFPI重组蛋白处理组的血小板粘附数目减少更为明显,与对照组相比减少了大约76.4%(P<0.01)。在聚氯乙烯材料的实验中,也得到了类似的结果,其中GST处理的材料表面的血小板数目比对照组减少了大约34.1%(P<0.05);TFPI重组蛋白比对照组则减少了大约74.8% (P<0.01)。在两种材料的实验中GST组与TFPI重组蛋白组之间相比都有明显的差异(P<0.05) (见图1)。
2.2 在体实验中机体内血小板沉积的影响 在体实验研究表明,Dacron组中,GST-tPA组血管血小板沉积明显少于GST组和空白对照组载体组和空白对照组,(P<0.05);PEEP组也得出相同的结论。见表1。
1 Conarweron JW,Stewart PS,Greenberg EP. Bacterial biofilms. A common cause of persistent infections. Science,1999,284:5418.
2 Tang L,Sheng Y. The mechanism of device-centered infection. Thans Soc Biomater ,1998,24:7.
3 Lijuen HR,Collen D.Strategies for the improvement of thrombolytic sgents.Throb Haemost,1991,66:88-110.
4 Collen D,Lijnen HR. Thrombolytic agents. Thromb haemost,2005,93(4):627-630.