乡人大主席述职报告范文

序论：在您撰写乡人大主席述职报告时，参考他人的优秀作品可以开阔视野，小编为您整理的7篇范文，希望这些建议能够激发您的创作热情，引导您走向新的创作高度。

第1篇

我于XX年11月任**乡党委委员、人大主席。按照乡党委的分工，我主持乡人大全面工作，先后分管产业开发、移民、林业、办公室及内务后勤等工作。两年来在乡党委政府的统一部署下，在抓好人大业务工作的的同时，大力推进了水产强乡和林业兴乡步伐，努力维护库区移民群众的稳定和发展，取得了良好的成绩，得到了人民群众的认可，也提高了自身综合素质。两年来出勤865天，住乡751天，下村715天，未请一天假。现将我两年来的德、能、勤、绩、廉等情况向各位领导和同志汇报如下：

一、突出抓好水产养殖业，打造水产强乡

水产养殖业是我乡的主导产业，我已连续三年分管这项工作，现该产业已初具规模，全乡网箱养鱼总量已达到23000口（其中美国斑点叉尾鮰6450口），拦网养鱼12处1600亩，养有各类品种18个，年成鱼起水量6500吨，年产值达4000万元。两年来我主要开展的工作是稳产业、调结构、增效益。一是取得了重大鱼病疫情防控工作的胜利。今年4月10日起，我乡的美国斑点叉尾鮰爆发了以细菌性败血症和套肠病为主的重大鱼病疫情，作为此次鱼病防控工作的主要指挥人员，我与县移民局和水产公司领导通力合作，连续奋战45天，召开工作联席会议15次，发动乡村两级干部60多人，深入到所有养殖户网箱，全力开展鱼病防控工作。保住存活成鱼XX吨，处置清理死鱼1360吨，取得了今年全国同类水库鱼病防控工作的最好成绩，保住了60%的美国斑点叉尾鮰成鱼，稳住了整个网箱养鱼产业的健康发展。二是积极进行品种结构调整，化解养殖风险。为改变我乡水产养殖业、品种单一、风险集中的情况，我与县水产公司一道积极引导养殖户进行了科学地品种结构调整，扩大了四大家鱼的养殖量，引进了部分名特优鱼种。引进了丁桂鱼、加州鲈、翘鱼、匙尾鲟等鱼种，加大了鲢鱼、青鱼、草鱼、鳜鱼等养殖量，使养殖区域的品种结构逐步趋于合理。三是探索科学的产业发展模式，提高市场化程度、增加养殖效益。与县移民局领导和公司人员一道，多次深入到养殖重点村、养殖大户开展座谈、调研，把水产养殖业的工作重点放在了提高产业发展的组织化和市场化程度、进行品牌化经营上来。开展了实施大库拦网养鱼和引进成鱼加工厂等项目的前期筹备工作,正在撰写推进五强溪库区渔业发展的调研文章。

二、突出抓好山区林业，实施林业兴乡

**乡是湖南省林业采伐制度改革试点乡镇之一，全乡共有林地面积13.1万亩，其中公益生态林9.8万亩，活立蓄积量252438立方米，退耕还林及荒山造林11047亩，每年林农可获得退耕还林等各项补贴290多万元，全年商品材出材量在7000方左右，林农可获益300万元，林业也是我乡继水产养殖后的又一支柱产业。我分管林业工作也有两年时间，在XX年全面完成林业采伐制度试点改革和集体林权制度改革任务后，今年上半年主要开展的工作就是认真落实《森林经营方案》，落实改革措施。主要开展了四项工作。一是把好林木采伐许可证的发放关，严格按照《森林经营方案》的要求，采取由林农提出采伐申请、村林业理事会进行公示，然后进行作业设计和审批，按照“阳光林业”的要求进行采伐计划的分配和采伐证许可证的发放，目前已落实商品材采伐任务6500方；二是把好采伐迹地的植被恢复关，只砍不造或重砍轻造是林业采伐长期存在的弊端，为此，XX年我们实施了造林保金制度，并带领林业站工作人员深入山场督促农户炼山、造林，完成炼山面积XX亩，新造工业原料林1000亩，三边绿化造林200亩；三是把好木材运输证的检尺关，XX年我们严格按按照《湖南省林木运输证办理程序》进行操作，要求每次商品材装船装车，林业站必须现场检尺，村林业员到场监督，防治大面积的超方或木材走私现象，保证了国家税费和林农的利益不受损失；四是把好山林纠纷的调处关，我乡XX年还剩有16处2800多亩纠纷地没有发证，为全面完成发证任务，我和林业站工作人员一道及时深入到山块、村组进行调查和调处，现已完成调处任务7处1300亩面积，全年可全部完成任务。

第2篇

一、 认真学习，努力提高自身素质

当今时代，要想服务于人民群众，就必须认真学习理论知识，努力提高自身素质。为此，本人能不断地学习“三个代表”重要思想和深入学习贯彻落实科学发展观，以及学习党的各项路线、方针、政策以及国家法律、法规、努力提高自身理论水平，提高执政能力。

二、 恪守职责，认真搞好本职工作

乡镇人大工作在人民心目中是一种修养职业，认为这个部门是可有可无的，但通过接触，人大改变了我的观念，知道这是一个负有重任的岗位，它要代表人民搞好各项监督、讨论各项重要决策，参与经济建设的实施。

半年来，我配合人大主席组织主席团成员和市、镇人大代表视察了我镇农房灾后重建、“六进村”和村级活动场所建设等重点工程建设，听取镇人民政府刘昌海、梁成二位副镇长的工作汇报，按照主席团的工作安排对学校工程、农村集中点建房等提出建议并指出不足及提出整改意见。二是能坚持走访代表，收集各方面意见，为党委的各项决策提供重要依据，同时也能提出一些参考意见和建议。能服从党委安排，积极参加各项中心工作并能认真扎实地完成好。

三、 求真务实，勤政为民，认真搞好驻村工作

乡镇干部每年都要驻1—2个村，每年不管党委安排我驻哪个村，我都能兢兢业业、努力工作，不但能很好完成党委下达所驻村的各项任务，还能会同村干部一道解决一些疑难问题或办一件实事。今年继续驻庆云村并协助村两委工作，结合新形势、新任务，按照党委政府“三级联创”工作的安排意见，针对所驻村“两委”班子现状，协助村“两委”召开班子会议，党员群众代表会议，广泛征求意见，确定创建“五好”村党支部的创建措施。同时，协助村“两委”班子制定20__年精神文明及经济发展计划，做到目标明确、任务明确、职责明确。同时为扩大“五好”村党支部创建的实效，按照市委组织部的要求，在全面继续深入开展“党员系列教育月”活动，在个别村组开展了“四培养”活动等，协助搞好村部的扩建工作积极引导做好该村乡村旅游“农家乐”的开发。

四、 扎实推进灾后重建工作

确保农村永久性住房建设有序进行农村工作是全部工作的基础。为使广大农村受灾群众早日住进经济、实用、安全的永久性住房，积极协助党委政府围绕重心，出谋划策。面对复杂的农村永久性住房重建工作，积极协助学校灾后重建的拆迁、督促学校工程建设质量进度，认真抓好学校安全工作，搞好学校周边环境整治、确保社会稳定。 “保安民、保稳定”是一项急迫的事情。随着灾后重建工作的持续推进，为让群众知晓政策、克服等、靠、观、望的思想，我积极下乡活动，走进田间地头、向群众宣传政策、接受咨询，引导和鼓励受灾农户不等不靠，就地取材，进行重建。我所驻的__镇庆云村，是我镇的边远村，仅靠红岩、敖平，为德阳、成都两市的交界地方，在落实灾后重建政策时难度较大，社会信息复杂，工作难度不可想象。在经过艰苦细致的工作，在驻村工作组村两委的共同努力下，庆云村的灾后建设取得了可喜成绩，全村有住房680多户，完成重建400多户，取得了干部党员满意，受灾群众满意，受到了党委政府的肯定，全面的完成了农房的重建任务。

五、 廉洁自律，真心实意为服务

第3篇

2007年9月21日上午，一场代表向选民述职的报告会在象山县东陈乡樟岙村会议室举行，县人大代表姜文武向选区的选民代表郑重地述职。

这是东陈乡人大自2006年实行代表向选民述职制度以来，组织举行的第二场述职报告会。樟岙等13个村、70余位选民代表参加了会议。会上，县人大代表姜文武，乡人大代表王春娟、鲍宏友、徐亚红分别向选民代表作述职报告。

真诚面对选民

2006年，象山县东陈乡人大根据有关法律规定，建立人大代表向选民述职制度。乡人大召开主席团会议，要求8名县人大代表、55名乡人大代表任期内分别完成向选民述职的工作。还召开述职动员会，要求述职代表撰写书面述职报告，并于规定时间内送乡人大。东陈乡人大代表向选民述职制度还规定，代表述职的主要内容是：对代表工作的认识和重视情况；出席会议情况，包括参加人代会听取和审议乡人大、乡政府工作报告，审议表决各项决定、决议，依法选举地方国家机关组成人员等情况；闭会期间参加视察、检查、评议、座谈等活动情况；走访选民，联系群众，反映民意，为选民办实事情况；履行代表职责的体会，以及存在的不足和今后的打算，等等。

述职报告会气氛严肃认真。

乡人大代表徐亚红在2007年乡人代会上领衔提出关于要求解决乡中学生接送车问题、关于要求加大对水桶岙垃圾场治蝇治污治臭力度等建议，受到乡政府重视，被列入重点实事工程予以解决。徐亚红是民营企业的一名纺织女工，她经常利用休息日和晚上时间进村入户，深入到选民中去，听取选民意见，为解决选民的实际问题而奔走。她的述职报告事例充实，受到了选民代表的肯定。

乡十五届、十六届人大代表王春娟先后在乡人代会上领衔提出关于要求建造东陈自来水厂净化池、关于要求加强南盘水库水质污染整治力度、关于要求安装盛宁线沙岗到南堡段路灯等12件建议，都得到了政府部门的认真办理，赢得了选民的赞许。在述职报告会上，面对选民代表们的掌声，王春娟郑重地承诺：“选民给我的担子，我一定要继续挑好！”

与会选民代表充分肯定了姜文武等4位人大代表履行代表职务所取得的成绩，并当场就建造松岙水库、完善二轮土地承包等问题向人大代表提出了意见和建议。选民代表还要求人大代表要多挤出些时间到选民中去走一走、看一看、听一听，把老百姓的呼声反映到县、乡人代会上，多为选民办几件看得见摸得着的实事。

做一名“阳光人大代表”

能面对面地监督人大代表履行职责情况，选民代表陈瑞棉感到十分高兴。他认为，“人大代表为群众做了哪些事情，是否履行应尽的职责，为民代言的能力怎么样，这些问题以前对我们选民来说十分陌生。现在，通过代表向选民述职的形式，我们可以更好地了解和监督人大代表，这是对我们选民的尊重。”

选民代表励加强十分感慨地说：“今天，我们选民评议人大代表，真真切切成了主人翁。”他还说，“我以前也当过一届乡人大代表。从产生到届满，只有代表来监督政府及其部门，从来没有选民来监督代表履职。现在自己以选民的身份来评议监督人大代表，并把自己的诉求通过代表反映到人代会上去，反映到政府部门那里去，为我们选民解决实际问题，我们在监督代表的同时，自己也受到了教育。”

第4篇

为了进一步加强人大代表与选民的联系，提高人大代表的履职能力，充分发挥人大代表在各自工作岗位上的作用，达县赵固乡人大主席团于××年10月24日组织县、乡人大代表和部分选民参加县、乡人大代表的述职活动。

参加这次述职活动的县、乡人大代表和部分选民42人（其中：选民12人）。在这次述职活动中，有县人大代表%%3人述职。参会代表认真听取了3位代表的述职，并就他们的述职报告结合平时的工作情况进行了评议。

××同志作为县人大代表和南井村支部书记，不仅认真做好自己的本职工作，加强党员队伍建设，发动党员带领全村人民发家至富；还经常关心和注意听取群众的呼声，及时反映社情民意。200*年，他带领全村人民走集约化农业道路，调整产业结构，取得了较好的成绩，为我乡的经济发展积累了先进的经验。

乡人大代表××总结到，他在认真听取人民群众的呼声的同时，认真做好本职工作。特别是分管的民政工作和计划生育工作，在党委政府的坚强领导下和全体工作人员的共同努力下均取得了较好的成绩。一是加强干部监督和社会监督相结合的方式，不断增强低保评议工作的透明度，深入到村社，实地走访群众，了解群众疾苦，确保低保工作应保尽保；二是针对我乡计划生育工作思想认识提高难、超计划生育统计难和违法生育处理的“三难问题”，加强政策宣传和执法工作，有力地推动了计划生育工作的落实。

第5篇

大家下午好！

我乡人大在县人大常委会的关心指导下，在乡党委的坚强有力领导下，能够从实际出发，围绕发展中心，突出工作重点，扎实有效地开展人大工作。现将我乡今年的工作情况和下一步工作计划汇报如下，不妥之处敬请各位领导和代表们批评指正。

一、开展规范化建设活动，夯实人大工作基础

一是以村办公室为阵地，建设“代表之家”。把全乡的县乡人大代表划分4个代表小组，按照便于代表活动的原则，以村办公室为阵地，建设4个“代表之家”。二是加强制度建设，使人大工作正常化。建立了人大代表学习制度、视察制度、联系制度、评议制度和代表小组活动制度以及代表议案、建议办理制度等六项制度。三是落实工作人员，规范人大档案。

二、顺利召开了我乡十二届人大三次会议

2009年4月份，在县人大有关领导的亲自指导下，在乡党委的领导下，根据法定程序，我乡顺利召开了乡十二届人大三次会议，圆满完成了各项会议议程。

三、认真开展工作评议活动

2009年元月5日，在乡党委的高度重视下，在乡政府的大力支持下，乡人大组织市、县人大代表和乡人大代表团团长对乡政府有关职能部门和乡直有关单位进行了工作评议。人大代表们认真听取了各部门主要负责人的工作述职，在公正、公开、公平的原则上，对8个参评单位进行了量化打分评比，并在评议大会上现场颁奖。县人大常委会有关领导不仅亲自参加了工作评议，而且在会上作了重要讲话，对评议活动给予了高度评价。通过工作评议活动，人大代表们一致认为，乡人大主席团事前工作安排周密，准备充分，各单位主要负责人对待工作评议态度积极，述职报告内容详实。此项工作不仅能督促被评议单位改善服务质量、提高服务水平，更好地为群众服务，还能提高被评议单位的对外形象，必将对我乡经济社会又好又快发展起到积极的推动作用。

四、围绕发挥代表作用，积极开展代表调研视察活动

今年4月11日，乡人大组织市、县人大代表和乡人大代表团团长进行了调研视察活动。乡政府有关职能部门和乡直有关单位负责人也参加了此项活动。通过对世华农业设施栽培、500千伏变电所和华光新农村等重点项目的调研视察。代表们一致认为，近年来我乡农业产业结构调整力度在加大，世华农业设施栽培的发展填补了我乡大棚蔬菜生产的空白；500千伏变电所的顺利落地，提升了众兴乡的对外形象；华光新农村建设的顺利实施，凝聚着党委的心血和政府的工作力度，彻底改善了项目建设区农民的生产、生活环境，有利于发展现代农业生产和旅游休闲产业，对众兴的经济社会发展将起到积极的推动作用。此举得到了县人大有关负责人的充分肯定。

五、积极围绕乡党委开展中心工作

今年以来，乡人大在乡党委的领导下积极参加乡中心工作。人大主席多次到村督察有关工作，并亲自参与处理重点稳定工作，人大副主席不辞劳苦的战斗在新农村建设的第一线，为华光新农村建设做出了大量的扎实有效的工作。

今年我乡人大虽做了一些工作，取得了一定成绩，但与人民群众期望还有一定的距离，与上级的要求还有很大差距。面临新的形势和任务，下一步，我乡人大将在县人大常委会的关心、指导下，在乡党委的领导下，以更加务实的作风，围绕发展中心，突出工作重点，注重工作实效，通过抓自身建设，抓代表活动，抓督查督办，使人大工作进一步规范，人大代表的作用得到更好发挥，为推动基层民主政治建设，促进我乡经济社会又好又快发展，将着重做好以下几个方面工作：

一是加强制度建设，促进人大工作规范化，夯实我乡人大工作基础；

二是围绕社会热点、难点问题，积极组织代表活动，计划在11月份就新农村建设、工业聚集区发展、村村通工程、农业农村工作再次开展代表调研视察活动；

三是开展调研评议活动，发挥代表的监督作用。计划在12月份对乡政府办站所和乡直有关单位开展工作评议活动；

四是高度重视议案办理，着力解决热点难点问题。积极开展督查，推动政府中心工作，特别是在新农村建设、招商引资、工业经济、文明创建、村村通工程等方面重点展开工作；

五是加强人大宣传的信息报道工作，推进民主法制建设；

第6篇

【关键词】 川芎嗪注射液; 腹膜间皮细胞; 高糖; ⅰ型胶原; 基质金属蛋白酶?1; 基质金属蛋白酶抑制剂?1; 体外实验

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 65?69.

received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

indexed/abstracted in and full text link?out at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.

free full text (html and pdf) is available at .

forward linking and reference linking via crossref.

doi: 10.3736/jcim20090110open access

effects of ligustrazine injection on high glucose?induced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

gui?song zhu, jin?song he

department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase?1 (mmp?1) and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 (timp?1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low?, medium? and high?dose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semi?quantitative reverse transcription?polymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp?1 and timp?1 in culture supernatants were measured by enzyme?linked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucose?induced type ⅰ collagen and timp?1 expressions in a dose?dependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium? and high?dose ligustrazine injection could significantly increase mmp?1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp?1/timp?1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase?1; tissue inhibitor of metalloproteinase?1; in vitro

腹膜纤维化是腹膜透析治疗的主要并发症，最终导致腹膜功能衰竭，这是腹膜透析患者退出治疗的主要原因［1］。腹膜纤维化以细胞外基质（extracellular matrix, ecm）的过度沉积为特点［2］。研究表明，ecm的过度沉积是由于ecm合成与降解失衡而引起［3］。ⅰ型胶原是腹膜纤维化中主要的ecm［4］，其降解过程受基质金属蛋白酶?1（matrix metalloproteinase?1, mmp?1）及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂?1（tissue inhibitor of metalloproteinase?1, timp?1）调控［5］。有研究证实，高糖能上调腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型胶原和timp?1的表达，降低mmp?1活性［3］。本研究通过观察川芎嗪注射液对高糖刺激下hpmcs ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1表达的影响，探讨川芎嗪在防治腹膜纤维化中的作用及其机制。

1 材料和方法

1.1 试剂和主要仪器 川芎嗪注射液（江苏苏中药业集团股份有限公司，批准号为国药准字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江苏方强制药厂，批号为200710111）。磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi?1640粉剂等（gibco公司）；胰蛋白酶和琼脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1酶联免疫吸附测定（enzyme?linked immunosorbent assay, elisa）试剂盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量检测试剂盒（南京凯基生物科技公司）；ⅰ型胶原、mmp?1、timp?1和β?actin引物，m?mlv第一链cdna合成试剂盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗细胞角蛋白抗体、抗细胞波形蛋白抗体、第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体（北京中山生物技术有限公司）。nu?2500e二氧化碳培养箱（nuaire公司）；全自动酶标仪（biobank公司）；生物电泳图像分析系统（上海复日科技有限公司）。

1.2 实验方法

1.2.1 hpmcs的培养与鉴定 取来自南京大学医学院附属鼓楼医院普外科择期腹部手术患者（排除尿毒症、腹膜炎）捐献的大网膜组织，按文献［3］方法原代培养hpmcs，按1?3传代，第3代细胞用于实验，每次实验均由来自3个患者的标本进行3次独立实验。倒置相差显微镜观察hpmcs呈多边形，似铺路鹅卵石样外观；免疫组化鉴定抗细胞角蛋白抗体和抗波形蛋白抗体染色阳性，抗第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体染色阴性。

1.2.2 实验步骤和分组 hpmcs用含1％fcs的rpmi?1640培养液同步培养24 h后分为5组（每组设3个样本）：正常组（完全培养液）、高糖对照组（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高剂量川芎嗪（10、20和40 mg/l）组。各组完全培养液均为含有15％ fcs的rpmi?1640培养液。细胞置于37 ℃、5％ co2培养箱培养48 h。

1.2.3 elisa法检测细胞上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1含量 分组干预48 h后，离心收集上清液，按elisa试剂盒说明书检测ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1表达水平。用0.1 mol/l naoh溶解细胞沉淀，bca蛋白检测试剂盒测定细胞沉淀中蛋白质浓度，用相应蛋白质浓度结果校正检测结果。

1.2.4 半定量rt?pcr 分组处理同上。采用trizol一步法提取总rna，2 μg总rna进行逆转录合成cdna，50 μl反应体系进行pcr扩增，以β?actin作内参照（引物序列及反应条件见表1）。1.5％琼脂糖凝胶电泳（110 v，15 min）进行pcr产物鉴定，电泳图像分析仪扫描分析，mrna相对含量用其pcr产物吸光值（absorance, a）与β?actin a值的比值表示。引物及pcr反应条件见表1。

1.3 统计学方法 实验数据用x±s表示，采用spss 15.0软件进行统计分析，组间差异比较采用单因素方差分析，两组间均数比较采用lsd?t检验。检验水准α=0.05。 表1 ⅰ型胶原、mmp?1、timp?1和β?actin引物序列及pcr反应条件

2 结 果

2.1 上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1蛋白质水平 与正常组比较，高糖对照组上清液中ⅰ型胶原和timp?1含量显著升高（p<0.01），mmp?1含量显著下降（p<0.01）；与高糖对照组比较，低、中和高剂量川芎嗪组上清液中的ⅰ型胶原和timp?1含量显著降低（p<0.05, p<0.01），且两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组上清液mmp?1含量显著增加（p<0.01）。见表2。表2 各组上清液中ⅰ型胶原、mmp?1和timp?1蛋白质表达

2.2 hpmcsⅰ型胶原、mmp?1和timp?1 mrna的表达 与正常组比较，高糖对照组hpmcs ⅰ型胶原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna分别上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp?1/β?actin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；与高糖对照组相比，低、中、高剂量川芎嗪组ⅰ型胶原/β?actin mrna和timp?1/β?actin mrna表达水平均显著下调（p<0.05），两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组mmp?1/β?actin mrna表达显著增加（p<0.05）。见图1和图2。

3 讨 论

高糖透析液导致ecm过度沉积是腹膜纤维化的病理基础［2］，研究表明，高糖不仅增加hpmcsⅰ型胶原的表达，并且引起ⅰ型胶原降解酶系mmp?1/timp?1的表达失衡［3］。我们的研究结果与之基本相同，此外我们发现，川芎嗪能显著对抗高糖的上述作用。

在生理条件下，hpmcs可以产生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，几乎能降解全部ecm成分。timps是内源性分泌蛋白，作为mmps的特异性抑制因子，其n'端可与相应的mmps催化活性中心的锌离子结合而抑制其催化活性［7］。本实验通过研究川芎嗪对hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型胶原及其降解酶系mmp?1/timp?1分泌及表达的影响，旨在探讨川芎嗪对hpmcs在高糖环境下ⅰ型胶原的合成和降解的干预作用及其机制。结果显示，川芎嗪能显著降低高糖所致的ⅰ型胶原的过度合成，同时显著下调timp?1的表达，增加mmp?1的表达，提示川芎嗪亦能通过调节mmp?1/timp?1的平衡，从而促进ⅰ型胶原的降解，减少ecm沉积。由此我们推测，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用。

川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，属酰胺类生物碱，具有活血化瘀的功效。药理实验证明，川芎嗪具有扩张血管、改善微循环、调节免疫和钙离子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型胶原、timp?1和增加mmp?1表达的机制尚不清楚。以往的研究发现这可能与抑制转化细胞生长因子β1（transforming growth factor?β1, tgf?β1）表达有关［9, 10］。tgf?β1是重要的致纤维化细胞因子，参与了腹膜纤维化的病理过程［2］。tgf?β1可增加ⅰ型胶原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型胶原降解减少［3, 11］。有研究报道，川芎嗪能降低多种细胞如心肌细胞、肝细胞和血管内皮细胞的胶原合成和timp?1表达，而增加mmp?1的分泌和表达，进一步的研究发现这可能是通过抑制tgf?β/smads信号传导通路继而抑制tgf?β1表达的结果［9, 10, 12］。我们前期研究证实，川芎嗪能下调高糖致hpmcs tgf?β1的表达（文章待发表）。因此我们推测，川芎嗪抑制tgf?β1的表达可能是其抑制hpmcs ⅰ型胶原合成和调整mmp?1/timp?1表达平衡的机制之一，其具体机制将是我们下一步要研究的内容。

综上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型胶原的过度合成，并且通过调节mmp?1/timp?1的平衡，促进ⅰ型胶原降解，从而减少ecm的沉积，防止腹膜纤维化的发生和发展。因此，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用，这对腹膜纤维化的机制及其防治的研究有一定借鉴和应用价值。

【参考文献】

1 plum j, hermann s, fussh?ller a, schoenicke g, donner a, r?hrborn a, grabensee b. peritoneal sclerosis in peritoneal dialysis patients related to dialysis settings and peritoneal transport properties. kidney int suppl. 2001; 78: s42?s47.

2 yung s, liu zh, lai kn, li ls, chan tm. emodin ameliorates glucose?induced morphologic abnormalities and synthesis of transforming growth factor beta1 and fibronectin by human peritoneal mesothelial cells. perit dial int. 2001; 21(suppl 3): s41?s47.

3 kim jj, li jj, kim ks, kwak sj, jung ds, ryu dr, yoo th, choi hy, han sh, kim hj, yoon sy, han ds, kang sw. high glucose decreases collagenase expression and increases timp expression in cultured human peritoneal mesothelial cells. nephrol dial transplant. 2008; 23(2): 534?541.

4 perfumo f, altieri p, degl'innocenti ml, ghiggeri gm, caridi g, trivelli a, gusmano r. effects of peritoneal effluents on mesothelial cells in culture: cell proliferation and extracellular matrix regulation. nephrol dial transplant. 1996; 11(9): 1803?1809.

5 wang yd, yan py. expression of matrix metalloproteinase?1 and tissue inhibitor of metalloproteinase?1 in ulcerative colitis. world j gastroenterol. 2006; 12(37): 6050?6053.

6 visse r, nagase h. matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. circ res. 2003; 92(8): 827?839.

7 fujisaki k, tanabe n, suzuki n, mitsui n, oka h, ito k, maeno m. the effect of il?1alpha on the expression of matrix metalloproteinases, plasminogen activators, and their inhibitors in osteoblastic ros 17/2.8 cells. life sci. 2006; 78(17): 1975?1982.

8 huang y, chen sq, zhang g, chen rh. effect of tetromethylpyrazine and aminoguanidine on expression of vascular endothelial growth factor in kidney of diabetic rats. j chin integr med. 2004; 2(1): 39?41. chinese with abstract in english.

黄焱, 陈少强, 张更, 陈瑞华. 川芎嗪联合氨基胍对糖尿病大鼠肾脏血管内皮细胞生长因子表达的影响. 中西医结合学报. 2004; 2(1): 39?41.

9 lin yz, xu cx, deng yl, chen l, huang h, du j. effects of tetramethylpyrazine on fibrosis of atrial tissue and atrial fibrillation in a canine model of congestive heart failure induced by ventricular tachypacing. j chin integr med. 2006; 4(1): 35?38. chinese with abstract in english.

林亚洲, 许春萱, 邓玉莲, 陈林, 黄海, 杜建. 川芎嗪对心室快速起搏心力衰竭实验犬心房颤动及心房纤维化的影响. 中西医结合学报. 2006; 4(1): 35?38.

10 hua hy, li yy, ge sw. study of tetramethylpyrazine in treatment on liver fibrosis and mechanism in rats. zhong yao yao li yu lin chuang. 2007; 23(5): 60?62. chinese with abstract in english.

华海婴, 李艳瑛, 戈士文. 川芎嗪抗大鼠免疫损伤性肝纤维化作用及机制研究. 中药药理与临床. 2007; 23(5): 60?62.

第7篇

【关键词】  川芎嗪注射液; 腹膜间皮细胞; 高糖; ⅰ型胶原; 基质金属蛋白酶1; 基质金属蛋白酶抑制剂1; 体外实验

zhu gs, he js. j chin integr med. 2009; 7(1): 6569.

    received june 18, 2008; accepted july 22, 2008; published online january 15, 2009.

    indexed/abstracted in and full text linkout at pubmed. journal title in pubmed: zhong xi yi jie he xue bao.

    free full text (html and pdf) is available at .

    forward linking and reference linking via crossref.

    doi: 10.3736/jcim20090110open access

    effects of ligustrazine injection on high glucoseinduced type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 and tissue inhibitor of metalloproteinase1 expressions in human peritoneal mesothelial cells in vitro

    guisong zhu, jinsong he

    department of nephrology, the affiliated drum tower hospital, nanjing university medical school, nanjing, jiangsu province 210008, china

    objective: to investigate the effects of ligustrazine injection on type ⅰ collagen, matrix metalloproteinase1 (mmp1) and tissue inhibitor of metalloproteinase1 (timp1) expressions in human peritoneal mesothelial cells (hpmcs) cultured in high glucose conditions.

    methods: hpmcs were isolated from human omenta by trypsin digestion method and subcultured. then, the hpmcs were divided into normal control group, high glucose group and high glucose plus low, medium and highdose ligustrazine (10, 20 and 40 mg/l ligustrazine respectively) groups. semiquantitative reverse transcriptionpolymerase chain reaction was used to detect the expressions of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 mrnas in hpmcs. proteins of type ⅰ collagen, mmp1 and timp1 in culture supernatants were measured by enzymelinked immunosorbent assay (elisa). cell protein concentration was measured by trace bicinchoninic acid method to correct the elisa assay results.

    results: ligustrazine injection could significantly decrease high glucoseinduced type ⅰ collagen and timp1 expressions in a dosedependent manner both in protein and gene levels (p<0.05, p<0.01). in addition, medium and highdose ligustrazine injection could significantly increase mmp1 expression which was inhibited by high glucose concentrations (p<0.05).

    conclusion: ligustrazine injection does not only decrease type ⅰ collagen synthesis, but also promote its degradation by modulating unbalanced mmp1/timp1 expression in hpmcs cultured in high glucose conditions.

    keywords: ligustrazine injection; human peritoneal mesothelial cells; high glucose; type ⅰ collagen; matrix metalloproteinase1; tissue inhibitor of metalloproteinase1; in vitro

    腹膜纤维化是腹膜透析治疗的主要并发症，最终导致腹膜功能衰竭，这是腹膜透析患者退出治疗的主要原因［1］。腹膜纤维化以细胞外基质（extracellular matrix, ecm）的过度沉积为特点［2］。研究表明，ecm的过度沉积是由于ecm合成与降解失衡而引起［3］。ⅰ型胶原是腹膜纤维化中主要的ecm［4］，其降解过程受基质金属蛋白酶1（matrix metalloproteinase1, mmp1）及其特异性抑制剂金属蛋白酶组织抑制剂1（tissue inhibitor of metalloproteinase1, timp1）调控［5］。有研究证实，高糖能上调腹膜间皮细胞（human peritoneal mesothelial cells, hpmcs）ⅰ型胶原和timp1的表达，降低mmp1活性［3］。本研究通过观察川芎嗪注射液对高糖刺激下hpmcs ⅰ型胶原、mmp1和timp1表达的影响，探讨川芎嗪在防治腹膜纤维化中的作用及其机制。

    1  材料和方法

    1.1  试剂和主要仪器  川芎嗪注射液（江苏苏中药业集团股份有限公司，批准号为国药准字h20020630）；50％葡萄糖注射液（江苏方强制药厂，批号为200710111）。磷酸盐缓冲液（phosphate buffered solution, pbs）、胎牛血清（fetal calf serum, fcs）、trizol和rpmi1640粉剂等（gibco公司）；胰蛋白酶和琼脂糖粉等（promega公司）；ⅰ型胶原、mmp1和timp1酶联免疫吸附测定（enzymelinked immunosorbent assay, elisa）试剂盒（adl公司）；二喹啉甲酸（bicinchoninic acid, bca）蛋白含量检测试剂盒（南京凯基生物科技公司）；ⅰ型胶原、mmp1、timp1和βactin引物，mmlv第一链cdna合成试剂盒和taq酶等（invitrogen公司）；抗细胞角蛋白抗体、抗细胞波形蛋白抗体、第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体（北京中山生物技术有限公司）。nu2500e二氧化碳培养箱（nuaire公司）；全自动酶标仪（biobank公司）；生物电泳图像分析系统（上海复日科技有限公司）。

    1.2  实验方法

    1.2.1  hpmcs的培养与鉴定  取来自南京大学医学院附属鼓楼医院普外科择期腹部手术患者（排除尿毒症、腹膜炎）捐献的大网膜组织，按文献［3］方法原代培养hpmcs，按1︰3传代，第3代细胞用于实验，每次实验均由来自3个患者的标本进行3次独立实验。倒置相差显微镜观察hpmcs呈多边形，似铺路鹅卵石样外观；免疫组化鉴定抗细胞角蛋白抗体和抗波形蛋白抗体染色阳性，抗第ⅷ因子抗体和抗白细胞cd45抗体染色阴性。

    1.2.2  实验步骤和分组  hpmcs用含1％fcs的rpmi1640培养液同步培养24 h后分为5组（每组设3个样本）：正常组（完全培养液）、高糖对照组（2.5％葡萄糖）和高糖（2.5％葡萄糖）加低、中、高剂量川芎嗪（10、20和40 mg/l）组。各组完全培养液均为含有15％ fcs的rpmi1640培养液。细胞置于37 ℃、5％ co2培养箱培养48 h。

    1.2.3  elisa法检测细胞上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1含量  分组干预48 h后，离心收集上清液，按elisa试剂盒说明书检测ⅰ型胶原、mmp1和timp1表达水平。用0.1 mol/l naoh溶解细胞沉淀，bca蛋白检测试剂盒测定细胞沉淀中蛋白质浓度，用相应蛋白质浓度结果校正检测结果。

    1.2.4  半定量rtpcr  分组处理同上。采用trizol一步法提取总rna，2 μg总rna进行逆转录合成cdna，50 μl反应体系进行pcr扩增，以βactin作内参照（引物序列及反应条件见表1）。1.5％琼脂糖凝胶电泳（110 v，15 min）进行pcr产物鉴定，电泳图像分析仪扫描分析，mrna相对含量用其pcr产物吸光值（absorance, a）与βactin a值的比值表示。引物及pcr反应条件见表1。

    1.3  统计学方法  实验数据用x±s表示，采用spss 15.0软件进行统计分析，组间差异比较采用单因素方差分析，两组间均数比较采用lsdt检验。检验水准α=0.05。 表1  ⅰ型胶原、mmp1、timp1和βactin引物序列及pcr反应条件

    2  结  果

    2.1  上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1蛋白质水平  与正常组比较，高糖对照组上清液中ⅰ型胶原和timp1含量显著升高（p<0.01），mmp1含量显著下降（p<0.01）；与高糖对照组比较，低、中和高剂量川芎嗪组上清液中的ⅰ型胶原和timp1含量显著降低（p<0.05, p<0.01），且两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组上清液mmp1含量显著增加（p<0.01）。见表2。表2  各组上清液中ⅰ型胶原、mmp1和timp1蛋白质表达

    2.2  hpmcsⅰ型胶原、mmp1和timp1 mrna的表达  与正常组比较，高糖对照组hpmcs ⅰ型胶原/βactin mrna和timp1/βactin mrna分别上升（15.43±0.83）倍和（4.19±0.09）倍（p<0.01），mmp1/βactin mrna下降（86.9±0.44）%（p<0.01）；与高糖对照组相比，低、中、高剂量川芎嗪组ⅰ型胶原/βactin mrna和timp1/βactin mrna表达水平均显著下调（p<0.05），两者均呈量效关系，中、高剂量川芎嗪组mmp1/βactin mrna表达显著增加（p<0.05）。见图1和图2。

    3  讨  论

    高糖透析液导致ecm过度沉积是腹膜纤维化的病理基础［2］，研究表明，高糖不仅增加hpmcsⅰ型胶原的表达，并且引起ⅰ型胶原降解酶系mmp1/timp1的表达失衡［3］。我们的研究结果与之基本相同，此外我们发现，川芎嗪能显著对抗高糖的上述作用。

    在生理条件下，hpmcs可以产生一定量的ecm和mmps/timps［3, 6］。mmps是降解ecm的蛋白水解酶系，几乎能降解全部ecm成分。timps是内源性分泌蛋白，作为mmps的特异性抑制因子，其n'端可与相应的mmps催化活性中心的锌离子结合而抑制其催化活性［7］。本实验通过研究川芎嗪对hpmcs在高糖刺激下主要ecm ⅰ型胶原及其降解酶系mmp1/timp1分泌及表达的影响，旨在探讨川芎嗪对hpmcs在高糖环境下ⅰ型胶原的合成和降解的干预作用及其机制。结果显示，川芎嗪能显著降低高糖所致的ⅰ型胶原的过度合成，同时显著下调timp1的表达，增加mmp1的表达，提示川芎嗪亦能通过调节mmp1/timp1的平衡，从而促进ⅰ型胶原的降解，减少ecm沉积。由此我们推测，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用。

    川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，属酰胺类生物碱，具有活血化瘀的功效。药理实验证明，川芎嗪具有扩张血管、改善微循环、调节免疫和钙离子拮抗的作用［8］。目前川芎嗪抑制ⅰ型胶原、timp1和增加mmp1表达的机制尚不清楚。以往的研究发现这可能与抑制转化细胞生长因子β1（transforming growth factorβ1, tgfβ1）表达有关［9, 10］。tgfβ1是重要的致纤维化细胞因子，参与了腹膜纤维化的病理过程［2］。tgfβ1可增加ⅰ型胶原的合成，并且抑制mmps的活性而激活timps，使ⅰ型胶原降解减少［3, 11］。有研究报道，川芎嗪能降低多种细胞如心肌细胞、肝细胞和血管内皮细胞的胶原合成和timp1表达，而增加mmp1的分泌和表达，进一步的研究发现这可能是通过抑制tgfβ/smads信号传导通路继而抑制tgfβ1表达的结果［9, 10, 12］。我们前期研究证实，川芎嗪能下调高糖致hpmcs tgfβ1的表达（文章待发表）。因此我们推测，川芎嗪抑制tgfβ1的表达可能是其抑制hpmcs ⅰ型胶原合成和调整mmp1/timp1表达平衡的机制之一，其具体机制将是我们下一步要研究的内容。

    综上所述，川芎嗪能抑制高糖致hpmcs ⅰ型胶原的过度合成，并且通过调节mmp1/timp1的平衡，促进ⅰ型胶原降解，从而减少ecm的沉积，防止腹膜纤维化的发生和发展。因此，川芎嗪可能具有预防或延缓腹膜纤维化的作用，这对腹膜纤维化的机制及其防治的研究有一定借鉴和应用价值。

【参考文献】

  1 plum j, hermann s, fusshller a, schoenicke g, donner a, rhrborn a, grabensee b. peritoneal sclerosis in peritoneal dialysis patients related to dialysis settings and peritoneal transport properties. kidney int suppl. 2001; 78: s42s47.

2 yung s, liu zh, lai kn, li ls, chan tm. emodin ameliorates glucoseinduced morphologic abnormalities and synthesis of transforming growth factor beta1 and fibronectin by human peritoneal mesothelial cells. perit dial int. 2001; 21(suppl 3): s41s47.

3 kim jj, li jj, kim ks, kwak sj, jung ds, ryu dr, yoo th, choi hy, han sh, kim hj, yoon sy, han ds, kang sw. high glucose decreases collagenase expression and increases timp expression in cultured human peritoneal mesothelial cells. nephrol dial transplant. 2008; 23(2): 534541.

4 perfumo f, altieri p, degl'innocenti ml, ghiggeri gm, caridi g, trivelli a, gusmano r. effects of peritoneal effluents on mesothelial cells in culture: cell proliferation and extracellular matrix regulation. nephrol dial transplant. 1996; 11(9): 18031809.

5 wang yd, yan py. expression of matrix metalloproteinase1 and tissue inhibitor of metalloproteinase1 in ulcerative colitis. world j gastroenterol. 2006; 12(37): 60506053.

6 visse r, nagase h. matrix metalloproteinases and tissue inhibitors of metalloproteinases: structure, function, and biochemistry. circ res. 2003; 92(8): 827839.

7 fujisaki k, tanabe n, suzuki n, mitsui n, oka h, ito k, maeno m. the effect of il1alpha on the expression of matrix metalloproteinases, plasminogen activators, and their inhibitors in osteoblastic ros 17/2.8 cells. life sci. 2006; 78(17): 19751982.

8 huang y, chen sq, zhang g, chen rh. effect of tetromethylpyrazine and aminoguanidine on expression of vascular endothelial growth factor in kidney of diabetic rats. j chin integr med. 2004; 2(1): 3941. chinese with abstract in english.

黄焱, 陈少强, 张更, 陈瑞华. 川芎嗪联合氨基胍对糖尿病大鼠肾脏血管内皮细胞生长因子表达的影响. 中西医结合学报. 2004; 2(1): 3941.

9 lin yz, xu cx, deng yl, chen l, huang h, du j. effects of tetramethylpyrazine on fibrosis of atrial tissue and atrial fibrillation in a canine model of congestive heart failure induced by ventricular tachypacing. j chin integr med. 2006; 4(1): 3538. chinese with abstract in english.

林亚洲, 许春萱, 邓玉莲, 陈林, 黄海, 杜建. 川芎嗪对心室快速起搏心力衰竭实验犬心房颤动及心房纤维化的影响. 中西医结合学报. 2006; 4(1): 3538.

10 hua hy, li yy, ge sw. study of tetramethylpyrazine in treatment on liver fibrosis and mechanism in rats. zhong yao yao li yu lin chuang. 2007; 23(5): 6062. chinese with abstract in english.

华海婴, 李艳瑛, 戈士文. 川芎嗪抗大鼠免疫损伤性肝纤维化作用及机制研究. 中药药理与临床. 2007; 23(5): 6062.