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【关键词】地基下沉墙体裂缝浸水
一、工程概况
某办公楼于2007年3月7日正式施工，2007年8月26日竣工，9月18日投入使用。平面呈“一”字形布置，东西朝向，为2层砌体结构，层高为3.2m，总建筑面积为1667.1m2。该楼采用钢筋混凝土条形基础，地基处理采用条形基础下局部换填碾压垫层，垫层为500mm厚3：7灰土垫层，换填垫层下为素土夯填，是从大砂沟河道层起分层夯填到现有地坪，夯填厚度约8.0m；基础混凝土强度等级为C20，梁、板、柱混凝土强度等级为C25，墙体±0.000以下为M5.0水泥砂浆砌筑MU10机制砖，墙体±0.000以上为M5.0混合砂浆砌筑MU10机制砖。
2007年11月，该办公楼北出口进行河道综合治理、道路拓建，由于工程需要，进行了大砂沟的开挖及必要的降水施工。此时，办公楼场地出现地面塌陷，地基下沉，护坡、围墙、办公楼墙体出现裂缝等。随着最近雨水增多，该场地及办公楼的病害进一步加剧，严重影响到建筑物的正常安全使用。为此，受使用方委托，我单位对该办公楼地基下沉、墙体裂缝进行检测鉴定。
二、检测结果
（一）、地基检测
该办公楼场地是从大砂沟河道层起，分层回填到现有地坪的，回填厚度约8m，回填土层下的河道地层为本场地的软弱下卧层。
在距建筑物外墙1m范围内共布置了2个探孔，挖至灰土垫层底面。检测结果表明：该楼基础为钢筋混凝土条形基础，基础下为灰土换填垫层，由于散水下回填土含水量比较大、局部饱和呈淤泥状，探井中出现积水现象，造成探井无法继续往下开挖，未对灰土垫层厚度和外延宽度进行检测。
（二）、条形基础检测
1、该楼基础为钢筋混凝土条形基础，条形基础埋深为1.2～1.3m，其外边缘距离外墙为0.75～0.77mm，厚度为0.15～0.16m。
该楼±0.000以下墙体砌筑砖的抗压强度等级均为MU10，满足设计要求。大部分砌筑水泥砂浆强度等级大于M5，基本满足设计要求。条形基础表面较平整、砂浆饱满、灰缝均匀，局部砌筑存在灰缝不均匀、砂浆不饱满缺陷。地圈梁现龄期混凝土强度推定值为26.9MPa，满足设计要求。
从进行混凝土强度检测的构件看，大部分构件表面较平整、无蜂窝、麻面等缺陷，地圈梁未发现裂缝。
2、基础顶面上回填土检测：通过对2个探孔开挖，发现该建筑物条形基础顶面回填土土质均匀，局部含有少量建筑垃圾。在开挖深度范围内，回填土含水量较大，下部呈淤泥状，开挖探井中有积水，积水呈泥状，无臭味。由于回填土呈淤泥状，无法对该回填土采用环刀法取样进行了密实度检测。对素土进行了含水率检测，素土的含水率为26.2%~33.5%。
3、散水检测：该室外散水宽均大于1. 5m，室外散水做法自上而下为100~160mm素混凝土(部分散水进行二次浇筑厚度约50mm)，宽度大于1.5m；180～300mm灰土垫层，灰土拌和均匀。散水变形缝填充物脱落，大部分出现斜向裂缝及纵向裂缝。
4、室外地坪：建筑物周围室外地坪都进行了混凝土硬化处理，从地坪表面看，该场地地坪出现了下沉现象，部分室外混凝土地坪出现了裂缝，裂缝宽度一般为2～10mm，部分混凝土地坪在伸缩缝处出现裂缝及错位现象，裂缝宽度为12～60mm。因该场地整体下沉，导致该楼西侧围墙上的排水口高于现室外地坪标高，场地雨水无法排出，大量淤积在室外地坪，继而渗入地基。
5、围墙及护坡：围墙为240mm厚砖砌围墙，高约2.2m，每隔5.7m设置一个砖墩，部分围墙上出现1～7mm的竖向裂缝，西南角部位裂缝最为严重，西侧围墙产生向西位移，顶部向西侧向位移175mm，底部向西侧向位移128mm。办公楼西、南侧护坡采用块石砌筑，高度约6m，护坡西南角出现较严重裂缝，裂缝宽度3～65mm,局部块石有松动，西侧护坡最大向西位移115mm。护坡其它局部部位也有微小裂缝。南侧护坡底部有两道污水管出口，西侧护坡底部有建筑垃圾、块石、生活垃圾堆积，有块石护坡施工痕迹。
6、沉降观测
以该楼一层窗户的窗台作为沉降观测基线，进行了相对沉降观测，检测结果表明，该楼相对沉降量较大，该楼地基相对沉降检测结果详述如下：
（1）、从地基下沉的部位来看，东北角重、西南角轻，东侧重、西侧轻的特点。
（2）、从地基下沉相对数值来看，该建筑物最大相对下沉在3～4/F处。如以该建筑物6～7×A轴线窗台为零点，东侧3～4×F相对下沉92.5mm，东北角相对下沉84mm，东南角相对下沉41mm，西南角相对下沉3mm，西北角相对下沉16.5mm，最大相对沉降差为92.5mm，最大局部沉降差为39mm，最大局部倾斜率为6.1‰，远超过《建筑地基基础设计规范》GB50007-2002有关规定。
需要说明的是，建筑物窗台水泥砂浆抹面的标高参差不平，施工误差较大，对计算相对沉降值会带来一定误差。
（二）、上部结构检测
1、承重砌体结构检测：该楼墙体砌筑砖平均回弹值为30.14～37.43MPa，最小回弹值为27～28MPa，经回弹法检测的墙体砌筑多孔砖强度等级均大于MU10。砌筑砂浆强度检测结果表明，该楼承重墙体砌筑砂浆的强度未达到M5。墙体砌筑砖、砌筑砂浆外观质量：在可见墙体表面的构件中，大部分墙体表面平整，灰缝厚度均匀，砂浆饱满，局部砌筑竖缝砂浆不饱满及砂浆强度偏低。
2、抗震构造措施检查：该工程场地抗震设防烈度为8度，设计基本地震加速度值0.20g。该楼平面布置呈“一”字形，布置较规则，层数为两层，总高度为7.8m,层高为3.2m,房屋最大高宽比0.61，横墙最大间距7.2m，抗震构造措施满足《建筑抗震设计规范》GB50011-2001的要求。
3、构造柱：采用回弹法对构造柱混凝土抗压强度进行了检测，构造柱现龄期混凝土强度推定值为15.5～26.9MPa，所检测的个别构造柱现龄期混凝土强度不满足设计要求。从进行混凝土强度检测的构件看，构件表面平整、密实，个别部位存在蜂窝、麻面、粗糙等缺陷。通过对抽检的构造柱截面尺寸测量，截面尺寸在260～290mm之间，符合设计构造柱截面尺寸240×240mm的要求。
4、圈梁；采用回弹法对圈梁混凝土抗压强度进行了检测，按单个构件进行混凝土强度评定，该楼圈梁现龄期混凝土强度推定值为25.4～30.2MPa，所检测的圈梁现龄期混凝土强度满足设计要求。从进行混凝土强度检测的构件看，构件表面平整、密实。
5、现浇梁：采用回弹法对现浇梁柱混凝土抗压强度进行了检测，按单个构件进行混凝土强度评定，该楼现浇梁现龄期混凝土强度推定值为25.9～28.1MPa，所检测的现浇梁现龄期混凝土强度满足设计要求。从进行混凝土强度检测的构件看，构件表面平整、密实。通过抽检的2道现浇梁截面面尺寸测量，满足设计现浇梁截面尺寸的要求。
6、倾斜观测：本次检测，在该楼四角分别布置了测点，该楼相对倾斜观测结果表明：该楼倾斜规律与地基下沉基本一致。该楼墙体顶点向东侧向位移10～20mm，向北侧向位移4～8mm，最大顶点侧向位移20mm，最大倾斜率为3.13‰。检测结果表明：该楼倾斜未超出《民用建筑可靠性鉴定标准》GB 50292-1999中要求。
需要说明的是，建筑物四角墙面抹灰垂直度有一定的误差，对倾斜观测结果有一定的影响。
7、裂缝检测
（1）、裂缝的特点和规律
本次裂缝检测为现状检测。该楼裂缝的检测结果表明，该楼裂缝具有如下特点和规律：①、从裂缝出现的部位来看，该楼外墙重、内墙轻，二层重、一层轻等特点；②、从裂缝类型来看，有斜向裂缝、竖向裂缝和水平裂缝，且主要为斜向裂缝；③、从裂缝开展程度来看，裂缝宽度一般为0.2～3.0mm，最大裂缝宽度为5mm；④、从出现裂缝的构件来看，在墙体开裂较严重部位的圈梁、现浇梁未出现裂缝，该楼一、二层部分楼地面出现了裂缝，一层开展程度较重，部分窗间墙墙体出现贯通裂缝，裂缝宽度一般为1～2.5mm。
（2）、墙体的裂缝情况：该楼C轴、F轴纵墙主要为横向、斜向裂缝，斜向裂缝方向由南向北倾斜，裂缝宽度为0.2～3mm；F轴外纵墙在二层3轴处两侧出现了八字形裂缝。B×8～1轴线内纵墙主要为斜向裂缝，裂缝开展数量较少，主要集中在5～8轴墙段，裂缝方向为由南向北倾斜，裂缝宽度为0.2～1.0mm，B轴北侧墙体出现少量斜向裂缝，裂缝方向为由北向南，宽度为0.1～0.5mm；A轴线外纵墙主要为斜向裂缝，裂缝方向为由北向南倾斜，裂缝宽度为0.2～2mm。内横墙裂缝较少，一般为横向、斜向裂缝，大部分斜向裂缝方向由西向东倾斜，裂缝宽度为0.2～1.0mm,二层较多；一层3×C～F后砌的内横墙产生横向裂缝，最大裂缝宽度为5mm。
(3)、其他构件：经检查，未发现圈梁、构造柱、现浇梁裂缝，个别楼板、一层地面有纵、横向裂缝，裂缝宽度为0.5～2mm。
（4）、墙体裂缝原因分析
该工程墙体裂缝按其形成的原因，大致有以下几种类型：
①、地基下沉裂缝：该工程墙体裂缝，绝大部分为地基下沉裂缝。此种裂缝主要发生在外墙的斜向裂缝、纵横墙墙体交接处的竖向裂缝，是典型的因地基产生不均匀下沉的裂缝。
②、应力集中裂缝：此种裂缝主要发生在门、窗洞口部位，一般在门洞上部和窗洞口的角部。由于上述部位是墙的薄弱部位，在洞口角部易产生应力集中，则易产生应力集中裂缝。
③、温度裂缝：此种裂缝主要发生在顶层山墙、屋面女儿墙处，多数呈水平裂缝，少数为斜向裂缝。由于外界温度变化，屋盖与砌体互相约束，造成相互间温度变化不协调，导致砌体产生温度应力，温度应力超过砌体的抗拉强度或抗剪强度极限值时，产生温度裂缝。
（三）、围护系统检查：从目前的现状来看，该工程屋面防、排水基本完好，无严重渗漏现象；部分墙体有开裂现象，部分抹灰层有剥皮现象；部分门窗因地基不均匀下沉，已出现轻微变形；该楼室外地面均已做硬化处理，但地坪存在下沉、开裂、倒坡、变形缝未有填充物未等病害。
五、建筑物检测鉴定结果评定
（一）、地基基础：该办公楼场地具有软弱下卧层，办公楼钢筋混凝土条形基础、地基相对沉降量较大，地基最大相对沉降差为92.5mm，最大局部沉降差为39mm，最大倾斜6.1‰，变形较大；地基浸水，散水下回填土呈饱和状态，软塑，影响地基承载力。从地基变形、地基承载能力、沉降稳定趋势几方面分析，按照《民用建筑可靠性鉴定标准》GB 50292-1999的规定，该楼地基基础应评为Cu级，即安全性不符合国家规范的要求，显著影响整体承载，应采取措施。
（二）、上部结构：该办公楼施工质量基本能够满足设计要求，但由于地基不均匀下沉该楼墙体出现了不同程度的地基沉降裂缝、应力集中裂缝，最大裂缝宽度已达5.0mm，影响了承重墙体的整体性，对整体结构的抗震不利。按照《民用建筑可靠性鉴定标准》（GB 50292-1999）的规定，综合判定该工程上部结构应评为Bu级，即安全性略低于国家规范的要求，尚不显著影响整体承载，对个别构件采取措施。
（三）、围护系统：该所办公楼散水、室外地坪已产生裂缝，引起雨水通过裂缝浸水，严重影响了该楼地基承载力，不满足现行国家规范规定。按照《民用建筑可靠性鉴定标准》GB 50292-1999的规定，综合评定该楼围护系统应评为Cu级，即安全性不符合国家规范的要求，显著影响整体承载，应采取措施。
综合以上检测鉴定结果，该办公楼评为Csu级，即建筑物的安全性不符合《民用建筑可靠性鉴定标准》GB 50292-1999对Asu级的要求，显著影响整体承载，应采取措施，且可能有少数构件必须立即采取措施。
六、办公楼地基下沉、墙体裂缝原因分析
根据对该建筑物现场环境的踏勘、使用情况的调查，了解到以下情况：
（一）、该办公楼场地是从大砂沟河道层起，分层回填到现有地坪的，回填厚度约8m，回填土层下的原河道地层为本场地的软弱下卧层。当河道开挖、抽水等会引起软弱下卧层的变形，导致该楼场地地面下陷、护坡裂缝。
（二）、该楼西面护坡外紧贴着一道排洪明沟（大砂沟），该建筑物高出大砂沟床面约6m，据调查2007年11月市区北出口道路拓建施工单位在进行大砂沟河道施工时，在离大沙坪派出所护坡约2m处，开挖长15m、宽3m、深2m的沟槽进行河道围堰施工。
（三）、2008年2月，河道施工单位在离办公楼护坡约20m处的大砂沟再次开挖深达6m、宽4.5m沟槽，为便于施工，抽排沟槽内地下水。
（四）、该办公楼东侧1.5～5.2m处为新修公路，办公楼与公路之间人行道未进行硬化施工，且人行道施工面低于公路，雨水直接浸入办公楼前人行道土层中。
（五）、现场开挖发现，该办公楼散水下回填土含水量比较大、局部饱和呈淤泥状，且探井中出现积水现象。
（六）、2007年11月，由于院内地坪下沉造成化粪池开裂，雨水、污水不能正常排泄。
根据现场检测结果并结合以上几方面因素综合分析，引起该办公楼地基下沉、墙体裂缝的主要原因是地基土浸水湿陷所致，其浸水水源主要为办公楼东侧为新修公路雨水、场地地面水沿地面裂缝渗入；而场地地面裂缝主要是开挖河道施工时，降水引起场地软弱下卧层变形，并造成靠近河道一侧的排水管道及化粪池下沉、排水管接口漏水，场地浸水湿陷，造成混凝土地面断裂，场地地面排水不畅，雨水绝大部分都是通过地面裂缝渗入地基土层的。
引起办公楼场地出现地面塌陷、护坡、围墙出现裂缝的主要原因则是河道开挖、抽水等施工引起场地软弱下卧层的变形所致；次要原因是办公楼东侧为新修公路雨水、场地地面水沿地面裂缝渗入等。
七、结论及建议
（一）、检测鉴定结果表明，该办公楼评为Csu级，即建筑物的安全性不符合《民用建筑可靠性鉴定标准》GB 50292-1999对Asu级的要求，显著影响整体承载，应采取措施，且可能有少数构件必须立即采取措施。
（二）、该办公楼地基下沉、墙体裂缝的主要原因是地基土浸水湿陷所致，次要原因是河道开挖、抽水等会引起场地软弱下卧层的变形。其浸水水源主要为办公楼东侧为新修公路雨水、场地地面水沿地面裂缝渗入。
（三）、该办公楼场地地面塌陷、护坡、围墙出现裂缝的主要原因则是河道开挖、抽水等施工引起场地软弱下卧层的变形所致；次要原因是办公楼东侧新修公路的雨水、场地地面水沿地面裂缝渗入等。
（四）、建议对该楼所有管沟、管道进行检查维修，对散水、室外地坪裂缝、混凝土伸缩缝进行处理，并做好房屋四周地面的竖向排水，严禁水再次浸入地基。立即对办公楼前的人行道进行硬化处理，保证排水通畅。
（一）测量过程简述
（1）测量依据：JJG 700—1999《气相色谱仪检定规程》。
（2）测量环境条件：温度（15～25）℃，相对湿度40％～68％。
（3）测量标准：江苏省计量科学研究院提供的标准物质。具体为氮中甲烷标准气体。
（4）被量对象：气相色谱仪。
（5）测量方法：气相色谱仪（以下简称仪器）是在规定了仪器载气流速稳定性、柱箱温度稳定性、程序升温稳定性的情况下，用微量注射器注入一定体积的标准物质，利用试样中各组分在色谱柱中的气相和固定相间的分配及吸附系数不同，由载气把气体试样或汽化后的试样带入色谱柱中进行分离，并通过检测器进行检测的仪器。根据各组分的保留时间和响应值进行定性/定量分析。
（6）评定结果的使用：在符合上述条件下的测量结果，一般可参照使用本不确定度的评定方法。
（二）数学模型
火焰离子化检测器（FID）
＝ (2)
式中：FID的检测限（g/s）；
基线噪声，（mV）；
标准物质的进样量，（g）；
标准物质中溶质的峰面积，（mV·s）；
（三）各输入量的标准不确定度分量的评定
对某台气相色谱仪检测器为TCD的仪器，在室温（25±1）℃的环境下进行检定。
1标准物质的相对标准不确定度的评定
氮中甲烷标准气体相对不确定度通常由标准物质证书给出，其定值不确定度为1.5％，包含因子＝2，则：
＝0.015/2＝0.0075
2微量注射器校准值的相对标准不确定度的评定
微量注射器的体积刻度是重要的不确定度来源之一，所以，微量注射器必须经校准后才能使用。根据上级校准证书中给出的测量不确定度为0.5%，k=2,则
＝0.005/2＝0.0025
3 峰面积测量值的相对标准不确定度的评定
峰面积或峰高测量不确定度主要为进样的进样的重复性，规程规定进样6次,定量重复性为不大于3%，则：
＝0.03/＝0.0122
4基线噪声测量的相对标准不确定度的评定
对于工作站而言，基线噪声引起的一般为0.01。
（四）合成标准不确定度及扩展不确定度的评定
1灵敏系数
数学模型： ＝
灵敏系数： ＝1 ＝1＝－1
2各不确定度分量汇总及计算表
各不确定度分量汇总及计算表
5扩展不确定度的评定
[关键词]果蝇S2细胞；荧光素酶；启动子；报告基因；转染
在研究基因功能的过程中，不可避免地要研究基因的调控机制，而基因的表达产物复杂且难以对其定量和定性，要在细胞生长周期的任意点了解细胞的基因表达产物更是非常困难。但报告基因分析系统的发现给基因调控与表达的研究带来了新的希望。近年来，报告基因系统的研究取得了快速的发展。报告基因是一种编码某种易于检测蛋白质或酶的基因，通过它的表达产物来标定目的基因的表达调控，因此，对真核基因调控的了解可以不通过直接测定调控元件调节转录速率的能力，而是把顺式调控元件与报告基因的序列连接起来，在基因转录的过程中测定报告基因转录产物的表达量，从而判断相应的顺式作用元件的调控能力。作为报告基因必须具备以下特点：（1）由原核基因编码的基因产物必须区别于转染前真核细胞内任何相似的产物；（2）细胞内其他基因产物不会干扰报告基因产物的检测；（3）报告基因编码产物的检测应该快速、简便、灵敏度高、重复性好。该技术的主要优点是灵敏度高、可信性大及检测方便且适合大规模检测，目前已广泛应用于启动子分析、监控转基因及其表达、细胞的信号转导与药物的筛选等多种细胞事件[13]。荧光素酶（LUC）报告基因来源于北美萤火虫，能催化萤火虫的氧化性羧化作用，同时发射出光子，可被光度计捕获定量。LUC的分析具有快速、方便、线性较好等优点，正成为最广泛使用的报告基因。pGL3系列的质粒就是带有LUC报告基因的质粒载体，我们可以利用这一系列的工具载体研究果蝇中基因的表达调控方式，其中pGL3Control带有SV40的启动子和增强子。SV40是一种猴病毒， 它的增强子/启动子区域可使其在大多数细胞株中有高度的组成性表达，因而广泛用于构建真核基因的表达载体，因此pGL3Control可作为检测体系中的阳性对照。但由于SV40启动子在果蝇S2细胞中不表达，所以我们将果蝇actin 5C 蛋白的启动子（pac）[4]构建到质粒pGL3Basic中，得到了高表达LUC的重组载体pGL3pac。这一质粒的构建可为研究果蝇中基因的调控方式奠定基础，同时也可为研究其他报告基因在不同细胞中的表达提供借鉴作用。
1 材料和方法
1.1 菌株、质粒及试剂大肠杆菌DH5α（作者所在实验室保存），质粒pGL3Basic(Promega公司)，pAc5.1/V5His/LacZ(Invitrogen公司)，限制性内切酶XhoⅠ、HindⅢ及T4连接酶、DNA聚合酶(TaKaRa公司)，小量胶回收试剂盒(TaKaRa公司)，中量质粒抽提试剂盒(Invitrogen公司)，LUC检测试剂盒(Promega公司)，S2细胞Schneider培养基(Invitrogen公司)，胎牛血清（Gibco公司）。
12 方法
1.2.1 pac启动子的获得 以pAc5.1/V5His/LacZ质粒为模板进行PCR扩增。上游引物5′GCGCCTCGAGCTTCAAGGAATTAATTCTATATTCT3′，下游引物5′GCGCAAGCTTGGTCTCTGGATTAGACGACT3′（划线部分分别为XhoⅠ和HindⅢ酶切位点）。PCR反应参数为：95 ℃ 5 min；94 ℃ 1 min，60 ℃ 1 min，72 ℃ 2 min，共30个循环； 72 ℃延伸10 min。
1.2.2 重组质粒的构建鉴定与中量抽提纯化 PCR产物分别经XhoⅠ、HindⅢ双酶切后进行琼脂糖凝胶电泳，割胶回收酶切片段，与同样经酶切、割胶回收的pGL3Basic质粒于16 ℃连接过夜，连接产物转化大肠杆菌DH5α，并涂布于含氨苄青霉素（终质量浓度为50 mg・L-1）的固体培养基上，37 ℃过夜培养。挑阳性克隆提取质粒，酶切和测序鉴定，鉴定正确的质粒经中量质粒抽提试剂盒提取纯化。
1.2.3 S2细胞培养及瞬时转染 S2细胞由本实验室冻存，使用Schneider培养基，补以10%胎牛血清。S2细胞培养在28 ℃无CO2培养箱中，根据其生长状态，按一定比例每3 d传代1次。待细胞生长状态良好时进行瞬时转染分析。转染时在12孔板中接种1×106个细胞，加入1 ml含10%胎牛血清的Schneider培养基，置28 ℃无CO2培养箱中培养6～16 h[细胞生长至对数生长期达（2～4）×106ml-1]，在1.5 ml Eppendorf 管中准备以下试剂：溶液A，12 μl 2 mol・L-1 CaCl2，5 μg重组质粒，1 μg pAcLacZ质粒，加入双蒸水至总体积为100 μl，混匀待用；溶液B，100 μl2×HBS。将A溶液缓慢加入B溶液中，轻轻混匀，室温放置30 min，以形成Ca3PO4DNA复合物。将Ca3PO4DNA复合物逐滴加至细胞上，混匀后置28 ℃无CO2培养箱中继续培养，24 h后用含10%胎牛血清的Schneider培养基给细胞换液。细胞转染48 h后裂解细胞，先吸去培养液，用PBS洗2遍，在每个培养孔中加入200 μl Reporter lysis buffer，保证充分覆盖细胞，冻融1次以确保细胞裂解，将细胞裂解液移至1.5 ml Eppendorf管中，振荡10～15 s，离心（12 000×g，2 min，4 ℃），转移上清于新管。制备好的细胞裂解液可用于测定或贮存于-70 ℃备用。
1.2.4 LUC和β半乳糖苷酶(βgal)活性测定 取制备好的细胞裂解液进行LUC和βgal活性的测定。LUC活性测定前取20 μl平衡至室温的细胞裂解液，加入80 μl LUC底物，迅速混匀，置光度计中，记录读数。βgal活性测定根据分子克隆的方法，在每个用于测定转染细胞裂解物的Eppendorf管中加入100×Mg2+ 3 μl、1×ONPG 66 μl、细胞裂解物30 μl、0.1 mol・L-1Na3PO4 201 μl，混匀。置37 ℃保温30 min，以500 μl 1 mol・L-1 Na2CO3终止显色反应。置酶标仪上，在波长420 nm处读光吸收值来表示βgal的活性，以共转化的βgal活性作为内源对照，以/βgal活性的值为系数，比较各组在转化效率相同时LUC活性的相互关系。以没有任何插入片段时pGL3Basic的LUC活性为1，比较加上插入片段pac启动子后的LUC活性增加的倍数，即LUC的相对活性，以反映LUC基因表达的相对水平。
2 结
果
2.1 重组载体的构建鉴定与纯化以pAc5.1/V5His/LacZ质粒为模板，通过上游引物和下游引物PCR扩增获得pac启动子2 500 bp基因片段（图1），用XhoⅠ、HindⅢ双酶切后克隆到载体pGL3Basic中（图2）。提取重组阳性质粒，XhoⅠ、HindⅢ双酶切后得到2 500 bp的基因片段（图1）。经测序鉴定，阅读框架不变。鉴定完成的重组质粒经过质粒中量抽提试剂盒提取纯化，得到符合转染所需的高纯度高浓度的重组质粒pGL3pac，经测定其260 nm的OD值，计算得到其浓度为0.99 μg・μl-1，A260 nm/A280 nm为1.81。
2.2 S2细胞的瞬时转染分析转染结果显示，pGL3Basic和pGL3Control中LUC的相对活性无明显差异，提示SV40启动子在果蝇S2细胞中不表达或低表达。而pGL3pac中插入了pac启动子，LUC的相对活性明显增高。pGL3pac在果蝇S2细胞中LUC的活性是pGL3Basic LUC活性的近2.7万倍。见表1。表1 瞬时转染后各组分酶活性值
3 讨
论
LUC是现在常用的一种报告基因，因其无放射性、检测快、灵敏度高、半衰期短、线性好等特点而得到广泛的应用。我们构建了pGL3pac这一重组质粒，使得在果蝇S2细胞中能够高表达LUC，为进一步的实验提供了一个好的工具。首先，它可作为基因启动子分析研究中的阳性对照，通过与该重组质粒的转染结果比较，从而判定不同顺式作用元件对转录的影响。其次，我们可以将目的基因某一区域的启动子元件插入到重组质粒pGL3pac启动子的上游或下游，通过LUC表达量改变的放大作用，进一步分析这些启动子元件的生物学作用，找到在转录过程中起到关键作用的核心启动子序列。在此基础上，我们还可以了解特定的反式作用因子对基因表达的影响。再次，还可以将目的基因自身的5′端或3′端的UTR序列插入到LUC基因的上下游，通过检测LUC的水平，为翻译水平的调控提供依据。在实验过程中，有很多方面值得我们注意。第一，在重组质粒利用中量试剂盒抽提纯化时，想得到浓度高的产物，应注意在菌液的培养量和培养时间上进行调整。因实际环境的不同，按照操作说明所示的条件往往难以得到足够的质粒量，通过增加培养的菌液量和延长培养时间可取得很好的效果。由于所得的质粒是细胞转染所需，故在抽提纯化时应特别强调无菌的原则。第二，在转染实验中，重组质粒pGL3pac必须共同转染表达另外一带有报告基因的质粒以衡量转染效率。我们选择了pAcLacZ，该质粒含lacZ基因，能够表达βgal，利用βgal水解底物ONPG的能力计算出βgal的活性，以此作为内源对照衡量不同组分的转染效率。这个质粒与目的质粒的转染比例对于结果有很大的影响。因βgal的活性在0.2～0.8之间符合线性范围，所以可根据这一要求摸索合适的转染比例，通过实验可得出两者在5∶1浓度比时较合适。另外，还可以选择带有其它报告基因的质粒载体，如phRL是一种带有海肾荧光素酶（RLUC）报告基因的质粒载体，如果选择phRL作为共转质粒则可通过在一管细胞裂解液中先后加入不同的底物，用同种仪器测定酶的活性即可，因其测定的两种酶的活性在同一数量级而且减少实验步骤，使实验数据更加可靠，实验过程更加简便[5]。第三，我们是通过瞬时转染得出结论，为排除一些因素的影响，转染实验必须重复3或4次，本实验的转染数据即是3次实验的平均值。在实验中我们选择了pac替代pGL3Control中的SV40启动子，主要是因为果蝇actin 5C蛋白组在果蝇体内为组成性表达且不需诱导，因此，利用pac作为替换启动子，不仅能产生较好的效果而且可简化实验操作。这一质粒的构建不仅为我们在细胞水平利用报告基因系统研究果蝇中基因的表达调控方式提供工具载体，而且它的构建方法提示我们可通过相同的途径构建适合转染不同类型细胞的带有报告基因的质粒载体，作为相应研究的基础。
[参考文献]
[1]LOUISE H. Reporter gene technology：the future looks bright [J].Biochem Pharmacol，1999，58:749757.
[2]GAMBHIR S S，BARRIO J R，HERSCHMAN H R，et al. Assays for noninvasive imaging of reporter gene expression [J]. Nucl Med Biol，1999，26：481490.
[3]LECLERC G M，BOOCKFOR F R，FAUGHT W J，et al.Development of a destabilized firefly luciferase enzyme for measurement of gene expression [J].Biotechniques，2000，29:590596.
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图1
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图2
图3
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大学即将毕业我们都会经历一个过程，那就是实习，参加实习工作的目的是为了把知识融会贯通提升自己的能力。下面是小编为大家整理的建筑测量顶岗实习报告范文的内容，希望能够帮助大家，欢迎阅读！
建筑测量顶岗实习报告一
秋风送爽，岁月流金，转眼又到一年开学时，我们_届的学生已经成为学长学姐了，开学的第三四周学校安排了我们班测量实习。现在为期两周的测量实习结束了，虽然实习只有短短的两周时间，准确的说只有十来天的时间，但是我们在这两周也就是十几天的实习过程中，学到了很多的东西，我们二小组成员的每一个人都收获很大。以下就是我对本次实习的一些心得：
实习使我们巩固了以前课堂上所学到的知识并且对以前的零碎的测量知识有了综合应用的机会。使我们对控制测量和地形图测绘过程的整体有了良好的了解及怎样放样也有了一定的掌握，对仪器的操作也更加娴熟了。
这次的实习使我收获了很多，比如我通过实习能更熟练的使用水准仪、经纬仪等测量仪器与工具，并能快速的架好仪器进行测量工作；较好的掌握了导线控制测量、地形图测绘的基本方法，很好的巩固了理论教学知识，提高了实际操作的技能。原先老师在课堂上讲解的测量知识也在实践中得到应用，并发挥了重要的作用，从而相互对照，将我的测量知识和测量水平提高了不少，同时在这实习中让我再次认识到实习的团队精神的重要性：每人的一个粗心，一个大意，都可能直接使我们一个上午的工作甚至一天的工作都白费，如果我们都毕业了在工作单位还是这样的大意，这样会直接影响工程的进度，甚至是带来一生都无发弥补的损失。
一次测量实习要完整的做完，但靠一个人的力量和构思是远远不够的，只有小组的合作和团结才能让实习快速而高效的完成，这次测量实习培养了我们小组的分工协作能力，增进了大家感情。虽然有的时候我们会因为一些实习中的自己的想法和大家吵的耳红面赤，但是大家最终的想法还是一致的，都是想把这次实习完成的更加完美。
我们小组成员在实习中的都付出了努力，最后很好的完成了这次的实习！
实习开始的第一天，我们先去了教室集中，听了我们测量指导老师的讲解，实习的小组人员安排，实习中的一些要注意的事项以及两周的实习任务安排，让我们大致的了解了实习安排和实习任务！随后由于实验楼仪器保管老师不在，暂时拿不到仪器，要第二天才能拿到仪器。指导老师只能叫我们几个组的成员先去踏勘选点。我们二组也听从了老师的安排，花了一个下午的时间去勘定了12个选点。
我们小组勘定了我们小组要勘的点后，大家就一起商量了一下明天我们测量的一些细节。
第二天上午可以领仪器了，我组在仪器室领了仪器之后，来到我们昨天勘定的一号点准备开始我们的第一天的实习了！
这天的上午，我们领来仪器后并没有很快的开始测量，我们而是先对仪器进行了检查以及熟悉了下仪器，对仪器各个部件及功能又进行进一步的认识，每个人都试着自己独立完成架仪器的操作。我们是用经纬仪用测回法进行测量。
下午我们正式开始了测量实习，今天的任务是完成我们测区范围内各个内角的测量。通过上午对仪器的熟悉，我们很快的在各个点架好仪器进行测角工作。测量过程中，并没有一帆风顺，我们遇到了一些问题，使我们测出来的角度有偏差。我们并没有放弃，第一次的测量出现了这个问题，我们小组成员进行了讨论，分析了出现问题的原因，之后我们又在各个点重新架好仪器，这次我们很细心的测量并很好的完成了测角的工作。五点多了，我们才完成了今天的测角工作。
第一天的测量不是很顺利，中间出现的问题是我们在测量工作中不注意就常常会发生的，这个小小的问题使我们第一次的测量结果出现错误。这次的问题也让我们认识到在进行测量工作时一定要细心，认真仔细的去做！
测量实习的第二天，我们是进行了各控制点的间距的测量，借鉴第一天的测量工作中出现的问题，我们今天打起十分的精神，认真细心的去做，一次就很准确的完成了控制点的间距的测量！我们小组的每个人都感到十分欣慰，这是一种进步。
第三天外面下着雨，我们没办法进行测量工作，我们在寝室回顾了两天的测量时的一些细节，出现的问题。并翻出书本把一些遗忘的知识进行了回顾！还一起探讨了接下去的工作怎么进行！
第四天我们进行了各控制点之间的夹角的测量，我的工作就是把其他成员的测量出来的数据记录在纸上。测量过程中每个人都很积极的做各自分配到的工作。
他们把测出的数据记录下来，我按照数据进行地形图的绘制，一开始还真不知道如何把它绘制好，绘制的时候总是出现各种各样的问题。之后测量指导老师给我们讲解了绘图的的方法以及测量的人应该注意的事项。
在老师的指导下我明白了绘制的方法及一些注意点，我按照指导老师教的方法进行绘制，这次绘制出来的比一开始要好了很多，我很快的就熟悉了绘制地形图，他们测一组数据，我马上就将这组数据绘制到图上，有时们的数据我在图上绘制时发现不对了，就对现场进行查看，分析是我绘图出现了问题还是他们测量出现了问题。当发现我绘图时并没有出现什么问题，我就把他们测出的数据出现的问题向他们指出，他们便很快的进行了对出现问题的点进行重新的测量！又有时我不能明白他们测的数据对应的点时，他们就对我细心的指点，我绘图出现了问题，他们也能很好的指出了。
接下来的几天都是测绘地形图，在大家的努力下我们比预计的时间提前了一天完成。
很快的我们就开始了绘图，我们先在图上设计了十二个控制点，代表我们要在图纸上需要的画图范围，这样才能在图纸上绘出其他需要标注的各个建筑物。
我们先是用老师选定的几个基础点，然后推算出了其他的十二个点的坐标，和各点到已知点的距离，和各点的方位角。这些东西搞完了过后才能根据我们测出的数据以及算出来的东西画出我们需要的图纸。所以我觉得绘图是整个测量实习过程中最伤脑筋的一环，曾不止一次令我们头痛。
在这次实习中，我们学到了测量的实际能力，更有面对困难的忍耐力，同时也认识到小组团结的重要性以及测量的步骤。首先，是熟悉了经纬仪用途及使用方法，掌握了仪器的检验和校正的方法，其次，在对数据的检查和校正的过程中，明白了各种测量误差的来源，其主要有三方面：仪器误差、外界影响误差、观测误差。了解如何避免测量结果误差，最大限度的就是减少误差的出现，即要做到：
1、提高自身的测量水平，降低误差。
2、科学处理数据的数学方法如：多次测量取平均数等来减少误差。
除此之外，还应掌握一套科学的测量方法，如：我们在控制点花费过多的时间，必须寻找科学的方法缩短测量时间，在有限的仪器情况下我们选择距离交汇法（皮尺），角度交汇法（经纬仪），分两组测量缩短时间。在测量中还要遵循一定的测量原则，如“从整体带局部”、“先控制后碎步”的工作原则，并做到步步有检核。这样做不但可以防止误差的积累，及时发现错误，更可以提高测量的效率。通过工程实践，学会了地形图的绘制和碎步的测量等课堂上无法做到的东西，很大程度上提高了动手和动脑的能力，同时也拓展了与同学的交际合作能力。一次测量实习要完整的做完，单靠一个人的力量和构思是远远不够的，如我们在碎步测量时分两组测量使我们测量工作大幅提速，只有我们本小组各成员的合作和团结才能让实习快速而高效的完成。
这次实习，我们学到很多的东西。让我更好的掌握了测量的基本功和测量的一些要素，同时也促进了与同学间的交往，使我懂得了团结互助的重要性以及仪器使用的正确方法
这次实习我想最大成功之处就是我们小组的团对合作精神。因为任何一项小的工作一个人都不能完成，必须有大伙的同力合作才能顺利完成工作。应该说，没有团队就没有我们今天的比较完美的实习结果。
经过两周的测量实习以及测量后数据处理，本次实习顺利结束。在这短短的两周里，我们在测量过程中遇到了不少的困难，我们也克服了不少的困难，解决了一些困扰已久的问题。所以这两周是紧张而又充实的两周。
建筑工程专业的测量是一项实践性比较强的工作。通过这次测量我在发现我是一个建筑工程专业的学生。测量也是一项务实求真的工作，来不得半点马虎，我们在测量实习中必须保持数据的原始性，这也是很重要的一点。为了确保计算的正确性可有效性，我们得反复校对各个测点的数据是否正确。我们在测量中不可避免地犯下一些错误，比如读数时估读不够准确，水准尺或花杆放得不垂直就读数，读数时间间隔过长，等等，都会引起一些误差，因此，我们在测量中内业计算要和测量同时进行，这样就可以及时发现错误，及时纠正错误，也避免了很多不必要的麻烦，节省时间，提高工作效率。由于这是一项历史性工作，很多数据在以后都可能用到，我们就要力种树各个数据的有效性，保留原始数据也利于以后的查证，这也体现了务实求真的精神，不仅在这次实验中，在以后的工作和生活中，我们也应该做到这一点。
这次的实习也是一次培养我们独立思考、工作能力的一次机会，在测量过程中，我们都要去想一想如何地去设点，怎样去测量，要测哪一些数据，如何才能够确保所测的数据有效性，然后一起讨论解决。我们都没有很丰富的经验，也没有测绘的天才，这就是要启发我们个人的主观能动性，发挥个人的聪明才智，自己给自己一次发挥的机会。
建筑测量顶岗实习报告二
自20xx年_月_日起，我们进行了为期14天的工程测量实习。
这次实习的内容是对工程测量知识的实践化，实习的要求是让每个同学都对工程测量的实际操作能够达到基本掌握的程度。这次实习与以前的课堂实习相比，时间更加集中、内容更加广泛、程序更加系统，完全从控制测量生产实际出发，加深对书本知识的进一步理解、掌握与综合应用，是培养我们理论联系实际、独立工作能力、综合分析问题和解决问题的能力、组织管理能力等方面素质。也是一次具体的、生动的、全面的技术实践活动。
在实习的第一天，由_x老师给我们做了实习的动员。在动员会上，x老师强调了本次实习的重要性，并分析了水电校地理条件较复杂及建筑物密集等因素给本次实习带来的困难。并鼓励同学们努力克服困难，努力完成本次实习。还讲解了仪器操作、搬迁中的注意事项，并要求在实习期间自行保管实习备品。本次实习中需要用到的仪器主要有水准仪、水准尺、脚架、经纬仪。当天我们就正式开始了室外的测量工作。
一、实习目的
1、巩固课堂教学知识，加深对控制测量学的基本理论的理解，能够用有关理论指导作业实践，做到理论与实践相统一，提高分析问题、解决问题的能力，从而对控制测量学的基本内容得到一次实际应用，使所学知识进一步巩固、深化。
2、通过实习，熟悉并掌握三、四等控制测量的作业程序及施测方法。
3、掌握用测量平差理论处理控制测量成果的基本技能。
4、通过完成控制测量实际任务的锻炼，提高独立从事测绘工作的计划、组织与管理能力，培养良好的咱也品质和职业道德。
5、熟悉水准仪、经纬仪、全站仪的工作原理。
二、实习心得
为期两个星期的工程测量学习已经结束了，通过这次实习，让我深刻明白了理论联系实际的重要性。测区是我们重庆市永川区水利电力职业技术学院校区，虽然测区比较大，基本上是整个学校，测绘图也是我们整个学校的平面图，为了能尽快地完成任务，我们小组星期六、星期天加班进行测量，我们在测量的过程中也并不感到累，也没有感到辛苦，反而还能自得其乐。
测量学首先是一项精确的工作，通过在学校期间在课堂上对测量学的学习，使我在脑海中形成了一个基本的、理论的测量学轮廓，而实习的目的，就是要将这些理论与实际工程联系起来。测量学是研究地球的形状和大小以及地面点位的科学，从本质上讲，测量学主要完成的任务就是确定地面目标在三维空间的位置以及随时间的变化。在信息社会里，测量学的作用日益重要，测量成果做为地球信息系统的基础，提供了最基本的空间位置信息。构建信息高速公路、基础地理信息系统及各种专题的和专业的地理信息系统，均迫切要求建立具有统一标准，可共享的测量数据库和测量成果信息系统。因此测量成为获取和更新基础地理信息最可靠，最准确的手段。测量学的分类有很多种，如普通测量学、大地测量学、摄影测量学、工程测量学。作为建筑工程系的学生，我们要学习测量的各个方面。测绘学基础就是这些专业知识的基础。
通过这次实习，学到了测量的实际能力，更有面对困难的忍耐力；也学到了小组之间的团结、默契，更锻炼了自己很多测绘的能力。首先，是熟悉了水准仪、经纬仪的用途，熟练了水准仪、经纬仪的各种使用方法，掌握了仪器的检验和校正方法。其次，在对数据的检查和矫正的过程中，明白了各种测量误差的来源，其主要有三个方面：仪器误差（仪器本身所决定，属客观误差来源）、观测误差（由于人员的技术水平而造成，属于主观误差来源）、外界影响误差（受到如温度、大气折射等外界因素的影响而这些因素又时时处于变动中而难以控制，属于可变动误差来源）。了解了如何避免测量结果错误，最大限度的减少测量误差的方法，即要作到：
（1）在仪器选择上要选择精度较高的合适仪器。
（2）提高自身的测量水平，降低误差水平。
（3）通过各种处理数据的数学方法如：距离测量中的温度改正、尺长改正，多次测量取平均值等来减少误差。
第三，除了熟悉了仪器的使用和明白了误差的来源和减少措施，还应掌握一套科学的测量方法，在测量中要遵循一定的测量原则，如：“从整体到局部”、“先控制后碎部”、“由高级到低级”的工作原则，并做到“步步有检核”。这样做不但可以防止误差的积累，及时发现错误，更可以提高测量的效率。通过实践，真正学到了很多实实在在的东西，比如对测量仪器的操作、整平更加熟练，学会了数字化地形图的绘制和碎部的测量等课堂上无法做到的东西，很大程度上提高了动手和动脑的能力。
我们在这次的实习中，也了解到了要想很好地进行测量，首先必须要掌握过硬的基本理论知识，要有实干精神，每个组员都必须亲自实践，而且要分工明确，工作也可以交换来做，还需要知道失败乃成功之母，在实习测量的过程中，不可能完全的没有错误，我们应该不气馁，继续一次又一次的重测，重计算，一次次地练习，一次次得提高测量水平，我们不断在经验中获得教训。而且也多亏了老师的指导，我们实习之初，遇到了各种各样的困难，多亏的老师的耐心讲解，才使我们解决了不少测量中的难题。
我们在实习过程中，不可避免的遇到了一些困难，在我们实现之初，我还有点担心自己不会测，测不好，担心只有两个星期的测量时间，自己不能按时的完成任务，但是，经过我们小组的反复测量，我们的团结、默契，克服了测量中的种种问题，终于按时完成了任务。在测量实习的过程中，我们也遇到了各种各样的困难。比如：
（1）立标尺时，标尺除立直外，还要选在重要的地方。因此，选点就非常重要，点一定要选在有代表性的地方，同时要注意并非点越多越好，相反选取的无用点过多不但会增加测量，计算和绘图的劳动量和多费时间，而且会因点多而杂乱产生较大的误差。
（2）在用水准仪和经纬仪测量的过程当中，有的过程出现了大的误差，经过我们的重新测量计算，误差范围也减小到了可以允许的范围里。
（3）还有就是计算问题，计算必须由两个人完成，一个初步的计算，一个检验，不过，在此过程当中，也还是出现了计算错误的问题，我们在不断的重复检验之中算出了正确的数值，尽量让误差减少到了最少
通过实际的测量实习，让我学到了很多实实在在的东西，比如对仪器的操作更加熟练，学会了地形图的绘制和碎部的测量等课堂上无法做到的东西，很大程度上提高了动手和动脑的能力，同时也拓展了与同学的交际、合作的能力。一次测量实习要完整的做完，单单靠一个人的力量和构思是远远不够的，只有小组的合作和团结才能让实习快速而高效的完成。
建筑测量顶岗实习报告三
一、前言
这次实习的内容是对工程测量知识的实践，实习的要求是让每个同学都对工程测量的实际操作能够达到基本掌握的程度。这次实习与以前的课堂实习相比，时间更加集中、内容更加广泛、程序更加系统，完全从控制测量生产实际出发，加深对书本知识的进一步理解、掌握与综合应用，是培养我们理论联系实际、独立工作能力、综合分析问题和解决问题的能力、组织管理能力等方面素质。也是一次具体的、生动的、全面的技术实践活动。
二、实习目的
巩固课堂教学知识，加深对控制测量学的基本理论的理解，能够用有关理论指导作业实践，做到理论与实践相统一，提高分析问题、解决问题的能力，从而对控制测量学的基本内容得到一次实际应用，使所学知识进一步巩固、深化。同时，熟悉水准仪、经纬仪、全站仪的工作原理。
三、实习心得
为期两个星期的工程测量学习已经结束了，通过这次实习，让我深刻明白了理论联系实际的重要性。测区是我们_学校，虽然测区比较大，基本上是整个学校，测绘图也是我们整个学校的平面图，为了能尽快地完成任务，我们小组星期六、星期天加班进行测量，我们在测量的过程中也并不感到累，也没有感到辛苦，反而还能自得其乐，同时也让我感叹良多。
首先，测量学是一项精确的工作，通过在学校期间在课堂上对测量学的学习，使我在脑海中形成了一个基本的、理论的测量学轮廓，而实习的目的，就是要将这些理论与实际工程联系起来。测量学是研究地球的形状和大小以及地面点位的科学，从本质上讲，测量学主要完成的任务就是确定地面目标在三维空间的位置以及随时间的变化。在信息社会里，测量学的作用日益重要，测量成果做为地球信息系统的基础，提供了最基本的空间位置信息。构建信息高速公路、基础地理信息系统及各种专题的和专业的地理信息系统，均迫切要求建立具有统一标准，可共享的测量数据库和测量成果信息系统。因此测量成为获取和更新基础地理信息最可靠，最准确的手段。测量学的分类有很多种，如普通测量学、大地测量学、摄影测量学、工程测量学。作为建筑工程系的学生，我们要学习测量的各个方面。测绘学基础就是这些专业知识的基础。
方法 采用全自动生化仪定量检测22 929例住院及门诊患者的全血标本G6PD，分析比较不同性别、民族和年龄者的检测结果。结果 G6PD总缺乏率为8.02%，其中男性缺乏率为9.49%，女性缺乏率为6.19%，男性缺乏率显著高于女性（P＜0.01）。汉族缺乏率为7.68%，壮族为9.08%，瑶族为11.05%，三种民族的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中少数民族的缺乏率显著高于汉族（P＜0.01）。0～18岁缺乏率为10.11%，19～45岁为6.58%，46～82岁为7.04%，不同年龄组的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中0～18岁的年龄段缺乏率最高（P＜0.01）。结论 G6PD缺乏症在本地区有较高的发病率，并且存在性别、民族和年龄上的差异，重视对住院病人和门诊就诊者的G6PD检测，对指导对症治疗用药、优生优育，提高人口素质等均具有重要的意义。
【关键词】 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；全血
文章编号：1003-1383(2012)04-0530-02
中图分类号：R 555 文献标识码：A
doi:10.3969/j.issn.1003-1383.2012.04.033
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose 6-phosphate dehidrogenase,G6PD）缺乏症在全世界累及1亿人以上，我国发生率约为0.2%～15.7%，尤以南方各省较高［1］。为了解本县辖区内人群G6PD缺乏发生率，我们收集在我院门诊就诊和住院病人的血标本，进行G6PD活性定量检测，现将结果报告如下。
对象与方法
1.对象 2010年11月～2011年9月我院住院和门诊就诊患者的全血标本22 929例，其中男性12 694例，女性10 235例。有汉族、壮族和瑶族，汉族18 343例占80.0%，壮族3 898例占17.0%，瑶族688例占3.0%。年龄0～82岁，其中0～18岁7 960例，19～45岁4 302例，46～82岁10 667例，农村和城镇分别为14 904例和8 025例。
2.仪器和试剂 仪器：日本罗氏Modular P800模块，试剂：长春汇力生物技术有限公司提供的G6PD定量试剂盒。用EDTA.K2抗凝管抽取静脉血，新生儿可采用脐带血。
3.方法 标本按操作说明书处理，经溶血后用定量法上机检测，各步操作均严格按照试剂和仪器说明书进行，并执行每天室内质控。标本送检后于当天检测，不能当天检测的置2～8℃冰箱保存次日检测。正常参考值范围：成人638～1980 U/L，脐带血：832～2460 U/L。低于参考值下限为缺乏。
4.观察项目 分析比较不同性别、民族和年龄者的检测结果。
5.统计学方法 采用SPSS 16.0统计软件处理数据。计数资料以百分率表示，组间比较用χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
结 果
1.不同性别的检测结果比较 22 929例全血标本G6PD酶活性测定总缺乏率为8.02%，其中男性缺乏率为9.49%，女性缺乏率为6.19%，男性缺乏率显著高于女性（P＜0.01）。见表1。
2.不同民族的检测结果比较 汉族缺乏率为7.68%，壮族为9.08%，瑶族为11.05%，三种民族的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中少数民族的缺乏率显著高于汉族
（P＜0.01）。见表2。
3.不同年龄段的检测结果比较 0～18岁缺乏率为10.11%，19～45岁为6.58%，46～82岁为7.04%，不同年龄组的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中0～18岁年龄段的缺乏率最高（P＜0.01）。见表3。
讨 论
G6PD缺乏症为伴性不完全显性遗传病，是世界上最常见的酶缺乏症，突变基因定位于X染色体上，男性为一条X和一条Y染色体，为半合子，酶活性显著降低，可以发病。其缺陷基因来自母亲，并传给女儿，她们均为杂合子，能产生足够量正常的G6PD酶，通常不出现任何症状。血中含G6PD酶活性正常和缺乏两类红细胞，两者之比例决定酶活性测定的结果，其变动幅度很大，多数为中间缺乏值，少数接近正常参考值，很少数与半合子相近而可发病。女性纯合子酶活性显著降低，只有当她们的儿子出现缺陷时，才可能发现其异常基因，但很少见。G6PD缺乏症的发病者绝大多数为男性［1］，因此临床上男性缺乏率高于女性缺乏率。本组资料男性缺乏率为9.49%，女性缺乏率为6.19%，男性缺乏率显著高于女性（P＜0.01），与上述理论相符，但性别缺乏率高于文献［2，3］报道，可能与不同地区、不同民族、不同年龄组，使用不同的检测方法有关。
不同民族间G6PD缺乏率，汉族为7.68%，壮族为9.08%，瑶族为11.05%，三种民族的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中少数民族的缺乏率显著高于汉族（P＜0.01）。可能与当地少数民族的生活习俗，例如偏爱使用民间医疗偏方，以及各民族间的婚姻状况和优生优育重视程度不同有关。
不同年龄组G6PD缺乏率为0～18岁10.11%，19～45岁为6.58%，46～82岁为7.04%，不同年龄组的缺乏率比较差异有统计学意义（P＜0.01），其中0～18岁的年龄段缺乏率最高（P＜0.01）。可能与2003年国家取消强制婚检后，人们对婚检不够重视，婚检率明显下降，导致出生缺陷儿明显上升有关。46～82岁比19～45岁缺乏率稍高，但差异无统计学意义（P＞0.05），可能与取消强制婚检前的医疗筛查水平较为稳定有关。
G6PD缺乏是一种红细胞酶缺陷症，引起溶血的主要原因是G6PD是一种可防止红细胞氧化的酶，如果G6PD不足，红细胞易受氧化损伤。当红细胞暴露于氧化剂，其细胞结构将改变，引起细胞内的血红蛋白沉淀（海因兹小体），造成红细胞破裂［4］，即溶血。常见溶血类型有先天性非球形红细胞性溶血性贫血、蚕豆病、药物诱发溶血、感染诱发溶血和新生儿高胆红素血症。目前筛查方法主要有高铁血红蛋白还原试验、硝基四氮唑蓝试验、Heinz小体、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶荧光斑点试验、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性测定、分子生物学法等，前四种方法为筛选试验，后两种方法为确诊试验［5］。本文采用全自动生化仪检测G6PD，能准确反映酶活性。G6PD缺乏患者，酶活性一般都降低，根据缺乏程度，缺乏程度越高，酶活性检测值越低。G6PD缺乏症目前尚无根治方法，一旦发病，只能对症治疗。
综上所述，G6PD缺乏症在本地区有较高的发病率，并且存在性别、民族和年龄上的差异，重视对住院病人和门诊就诊者的G6PD检测，对指导用药对症治疗、优生优育，提高人口素质等均具有重要的意义。
参考文献
［1］陶元鋆.葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症［M］//血液学及血液学检验.北京：人民卫生出版社，1997:116-118.
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关键词：甲醛的测定 乙酰丙酮分光光度法
一、甲醛的理化性质及测定方法
1.基本的理化性质
甲醛，HCHO，为一种无色、有强烈刺激性气味的气体。易溶于水、醇和醚。甲醛在常温下是气态，通常以水溶液形式出现。易溶于水和乙醇，35～40%的甲醛水溶液叫做福尔马林。甲醛的还原性很强，易和多种物质结合，且易于聚合。甲醛对人体的皮肤和粘膜具有刺激作用，进入人体后易于对人的中枢神经系统及视网膜造成损害。
2.标准限值
在采样体积为0.5～10.0L时，测定范围为0.5～800mg/m3。
3.方法介绍
甲醛气体经水吸收后，在pH=6的乙酸一乙酸铵缓冲溶液中，与乙酰丙酮作用，在沸水浴条件下，迅速生成稳定的黄色化合物，在波长413nm处测定。
二、实验部分
1.仪器和试剂
1.1仪器
多孔玻板吸收管、具塞比色管、水银温度计：0～100℃、pH酸度计、TU-1901 双光束紫外可见光分光光度计、恒温水浴
1.2试剂
不含有机物的蒸馏水：加少量高锰酸钾的碱性溶液于水中再行蒸馏即得（在整个蒸馏过程中水应始终保持红色，否则应随时补加高锰酸钾）。吸收液：不含有机物的重蒸馏水。乙酸铵（NH4CH3COO）。冰乙酸（CH3COOH）。乙酰丙酮（C5H8O2） 乙酰丙酮溶液：0.25%（V/V），称25g乙酸铵，加少量水溶解，加3ml冰乙酸及0.25ml新蒸馏的乙酰丙酮，混匀再加水至100ml，调整pH=6.0，此溶液于2～5℃贮存，可稳定一个月。盐酸（HCl）溶液、氢氧化钠（NaOH）溶液：30g/l00m1、甲醛标准使用液：在容量瓶中将甲醛标准贮备液逐级用水稀释成每毫升含5.0μg甲醛的标准使用溶液。2～5℃贮存，可稳定一周。纯水：电阻率大于18.0MΩ·cm
2.仪器条件
波长413nm，10 mm比色皿
三、步骤
1.校准曲线的绘制
取7支25ml具塞比色管分别加入5.00μg/ml甲醛标准溶液0.0ml、0.2ml、0.8ml、2.0ml、4.0ml、6.0ml、7.0ml。于上述标准系列中，用水稀释定容至10.0 ml刻线，加0.25%乙酰丙酮溶液2.0ml，混匀，置于沸水浴加热3min，取出冷却至室温，用1cm吸收池，以水为参比，于波长413nm处测定吸光度.将上述系列标准溶液测得的吸光度A值扣除试剂空白（零浓度）的吸光度A值，便得到校准吸光度y值，以校准吸光度y为纵坐标，以甲醛含量x（μg）为横坐标，绘制校准曲线，或用最小二乘法计算其回归方程式。
y=bx+a 式中：a- 校准曲线截距，b-校准曲线斜率。
2.样品测定
将吸收后的样品溶液移入50ml或100ml容量瓶中，用水稀释定容，取少于10ml试样（吸取量视试样浓度而定），于25ml比色管中，用水定容至10.0ml刻线，以下步骤按进行分光光度测定。
四、结果和讨论
1.标准曲线与实样测试
测试结果，响应值分别为0.004、0.025、0.090、0.223、0.450、0.684、0.786。计算得r=0.9999 回归方程为Y=0.0226x-0.00303 标准曲线的相关系数满足方法要求。
在试验过程中，带入国家标准编号为204517的质控样（0.72±0.047mg/L），测定值均为0.70，相对误差为2.78%；测试实样，平行样品测定值为1.71 mg/L与1.72mg/L，相对偏差为0.3%。最大相对误差和相对偏差均符合规定要求。对于未知浓度废水加标样的监测，结果为4.87mg/L，加标回收率为97.4%，加标回收率不低于95%，符合实验要求。
试验过程中，做21个空白试验。检出限D=4.6σ 。计算出的最低检出量D为0.365μg，当采样标况体积为9L时，检出限为0.041mg/m3。
2.现场空白和实验室空白
现场空白吸光度测得值分别为0.005，0.004，0.004。与实验室空白测定值（吸光度0.004）无明显差异，符合方法要求。
3.干扰与消除
当甲醛浓度为20μg/10ml时，共存8mg苯酚（400倍），10mg乙醛（500倍），600mg铵离子（30000倍）无干扰影响。
五、结论
通过对实样与质控样的测定结果分析可以看出，GB/T 15516-1995《空气质量 甲醛的测定 乙酰丙酮分光光度法》测定空气中的甲醛，其分析结果均符合国家规定要求，因此具备使用该方法测定空气中的甲醛含量的能力。
参考文献
