短小芽孢杆菌HB-3的分离鉴定及其淀粉酶的纯化特性研究

作者:阎华; 王会; 于博; 黄升谋; 李云捷; 吴进菊 湖北文理学院化学工程与食品科学学院; 湖北襄阳441053; 襄阳市中心医院; 湖北襄阳441053

摘要:从湖北省襄阳市三九酿酒厂下水道污泥分离筛选得到产淀粉酶菌株HB-3,根据菌株生长形态和生理生化特征分析,初步鉴定为短小芽孢杆菌。短小芽孢杆菌HB-3在淀粉培养基上培养72 h后,淀粉酶活力达到120.0 U/mL。然后使用DEAE-52和CM-52阴阳离子交换层析柱对短小芽孢杆菌HB-3产生的淀粉酶进行了部分纯化。结果表明,短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶经过部分纯化后,纯化倍数为5.9,酶活力回收率为90.9%。纯化后的淀粉酶使用SDS-PAGE凝胶电泳研究,以标准蛋白为对照,计算出短小芽孢杆菌HB-3中淀粉酶分子量为56.5 kDa。同时对短小芽孢杆菌HB-3的淀粉酶进行了纯化特性研究,结果表明,该酶的酶促反应最适温度为50℃,40~60℃热稳定性良好;该酶的酶促反应最适pH为5.0,pH 4.0~6.0酸碱稳定性良好,该酶对底物淀粉的反应动力学米氏常数Km为0.062 mmol/L,最大反应速率Vmax为3.019 mmol/(L·min)。

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